Asian Journal of Multidimensional Research (ajmr)

Asian Journal of Multidimensional Research (AJMR)

 

https://www.tarj.in

 

507 

 

AJMR 

RESULTS AND DISCUSSION 

The  method  consists  in  the  determination  of  nitrogen  according  to  Keldal  with  subsequent 

conversion to protein. 

From the averaged milled homogeneous sample of the investigated defatted meal of cotton seeds 

for  analysis,  weighed  in  a  test  tube  an  exact  sample,  with  an  error  of  no  more  than  0.1%.  The 

weighed  portion  was  quantitatively  transferred  into  a  Keldal  flask.  Further  experiments  were 

carried out according to methodological instructions [1]. 

Processing of the results: The mass fraction of nitrogen (X) in the test sample as a percentage of 

its mass during the distillation of ammonia into sulfuric acid was calculated by the formula 

Vo is the volume of 0.1 mol / l sodium hydroxide solution consumed for titration of 0.05 mol / l 

sulfuric  acid  in  the  control  experiment,  ml.  V1  is  the  volume  of  0.1  mol  /  l  sodium  hydroxide 

solution consumed for titration of sulfuric acid in the test solution, ml; K - correction to the titer 

of 0.1 mol / l sodium hydroxide solution; 

0.0014 is the amount of nitrogen equivalent to 1 ml of 0.05 mol / l sulfuric acid solution; 

M  is  the  weight  of  the  sample,  g.  The  arithmetic  mean  of  the  results  of  five  parallel  tests  was 

taken as the final test result. Results were calculated to the third decimal place and rounded to the 

second decimal place. 

The  mass  fraction  of  nitrogen  in  terms  of  dry  substance  of  the  product  (X3),  in  percent,  was 

calculated by the formula: 

 X1  -  mass  fraction  of  nitrogen  in  the  test  sample,%;  W  is  the  moisture  content  of  the  test 

sample,%. 

The mass fraction of protein (Y) in percent was calculated by the formula: Y = K CHX, where K 

is the conversion factor of nitrogen to protein: with a moderate lipid content - 6.38; 

HPLC  analysis  of  PTK  amino  acid  derivatives.  The  synthesis  of  FTC  (phenylthiocarbomail) 

derivatives  of  free  amino  acids  was  carried  out  according  to  the  method  of  Steven  A.,  Cohen 

Daviel. 

The  identification  of  FTC  amino  acids  is  carried  out  on  an  Agilent  Technologies  1200 

chromatograph on a 75x4.6 mm Discovery HS C18 column. Solution A: 0.14M CH3COONa  + 

0.05% TEA pH 6.4, B: CH3CN. Flow rate 1.2 ml / min, absorption 269nm. Gradient% B / min: 

1-6%  /  0-2.5min;  6-30%  /  2.51-40min;  30-60%  /  40.1-45min;  60-60%  /  45.1-50min;  60-0%  / 

50.1-55min.