|
4. Qon plazmasidagi oqsil tarkibini Biuret usuli bilan aniqlash.
Ishni bajarish tartibi: 1. To`rtta quruq probirka olib, uning birinchisiga 0,5 % li, ikkinchisiga 1,0 % li, uchinchisiga 1,5 % li oqsil eritmasi solinadi, to`rtinchi probirkaga miqdori noma`lum bo`lgan oqsil eritmasidan solinadi.
2. Har qaysi probirkaga 4 ml dan biuret reaktivi quyiladi, yaxshilab aralashtirgach, xona haroratida 20 daqiqa qoldiriladi. Shunda eritma asta-sekin rangga kiradi. FEK da ko`rib, 1 sm qalinlikdagi kuvetada o`lchanadi.
3. Oqsillar refraktometrda aniqlanadi.
Refraktometr – oqsil o`lchovchi apparat bo`lib, uning shkalasi bor, ozgina suv tomizilib, uning mili ma`lum burchakka to`g`irlanib, so`ng qon zardobi solib o`lchanadi. Jadvaldagi shkala ko`rsatkichiga qarab oqsil miqdori hisoblanadi. Bu usul nurning sinishiga asoslanadi. Bu usul bilan ishlashning bir talay afzalliklari mavjuddir. Chunki bu usul juda oddiy yo`l bilan bajariladi. Bu usul bilan qon plazmasi tarkibidagi oqsillarini aniqlash turli xastaliklarni oldini olishda va o`ta aniqlik bilan to`g`ri tashxislar qo`yishda tibbiy va fiziologik-biokimyoviy xususiyatlarga ega bo`ladi.
Bu usulda refraktometrda plazma oqsillarini aniqlash muhim ahamiyat kasb etadi. Refraktometr hozirgi kundagi eng keng tarqalgan va to`g`ri natijalarni ko`rsatadigan asboblar qatoriga kiradi.
2-Mavzu: Proteomika fanining asoslari.
Reja:
Proteomika xaqida tushuncha
2. Funktsional proteomika
3. Proteomikaning klinik jihatlari
1. Proteomika xaqida tushuncha
Oqsillar organizmning hayotini ta'minlaydigan, fermentlar vazifasini bajaradigan va shuningdek, genlarni chiqarib yuboradigan "vositalarni" ta'minlaydigan eng muhim biokimyoviy tarkibiy qismlaridan biridir. Proteom hujayra ichidagi barcha oqsillarni tavsiflaydi, to'qima yoki organizm. Ushbu to'plam bir necha ming turli xil oqsillarni va ularning hosilalarini o'z ichiga oladi. Shakl. 4.9 Ma'lum bo'lgan oqsillarning xilma-xilligi (organizmning umumiy proteomi) polipeptid zanjiridagi aminokislotalar soniga qarab oqsillar sonining taqsimlanishi sifatida taqdim etiladi. Tananing oqsil tarkibiy qismining bunday xilma-xilligi molekulyar diagnostikada alohida oqsillarni aniqlashni ancha qiyinlashtiradi. Umumiy ovqatda 50 dan ko'p bo'lmagan aminokislota qoldiqlarini o'z ichiga olgan oligopeptidlarning kichik oqsil molekulalari alohida rol o'ynaydi. Ushbu oqsillar o'ziga xos funktsiyalarga ega. Bularga, masalan, uglevod almashinuvining eng muhim regulyatori insulin kiradi. Bunga asab tizimini boshqarishda ishtirok etadigan neyropettidlar va peptidlar ham kiradi. Moskvaning ilmiy markazlarida oligopeptidlar uchun Regulaiory Oligopeptidlar (endogen regulyativ oligopeptidlar) maxsus ma'lumotlar banki yaratildi.
4.9-rasm. Ma'lum oqsillar sonining polipeptid zanjiridagi aminokislota qoldiqlari soniga bog'liqligi (zanjir uzunligi)
Shuni ta'kidlash kerakki, hozirgacha juda ko'p turli xil oqsillar kiritilgan Proteomikada bioinformatikaning vazifalari ma'lum oqsillarning xususiyatlari to'g'risida ma'lumotlar bazasini yaratish, bu ma'lumotlarni tahlil qilish va ularning ishlash mexanizmlarini aniqlash uchun hisoblash usullarini ishlab chiqishdir 4.10-rasmda biologik namunalardagi oqsillarni zamonaviy avtomatlashtirilgan kompyuterlashtirilgan identifikatsiyalash metodologiyasi diagrammasi ko'rsatilgan. ko'plab biologik namunalarni tezkor tahlil qilish va ehtimoliy tashxisni taqdim etish. Turli xil fiziologik va patologik jarayonlarda ishtirok etish samarali diagnostika markerlarining sifatini va ulardan oqsillarni dorivor moddalar sifatida ishlatilishini belgilaydi. Men turli xil oqsillarning xususiyatlarini aniqlash va o'rganish uchun t an'anaviy va yangi - posttenomik texnologiyalar.Ba'zi oqsillarni o'rganishda an'anaviy yondashuvlar - biokimyoviy va immunokimyoviy - individual oqsillarni ketma-ket o'rganishga asoslangan.
Ularning o'ziga xosligi, funktsional faolligi yoki antigenik xususiyatlaridan foydalangan holda individual oqsillar aniqlanadi.Bu bilan birga biologik namunalarni tahlil qilishda bir vaqtning o'zida biologik namunaning individual oqsillari yig'indisi o'rganiladi va umuman proteomning xususiyatlari olinadi.
Shakl: 4. 10. Bioassay va oqsilni kompyuterda aniqlash va molekulyar diagnostika: yaxshilanadigan oqsilning 1 pentidli barmoq izi LC-MSMS; Qo'llanilmaydigan barmoq izlari va olingan oqsillarning 2 ta kompyuter ma'lumotlar bazasi; O'rganilgan oqsillarning B 3 yaqin barmoq izlari namunalari 4 - biologik tahlilda aniqlangan oqsilning barmoq izlari elektroforezdan keng foydalaniladi
(4.11-rasm). Anod | Katod + Albumin Globulinlari Rays
Do'stlaringiz bilan baham: |
