Glyukoamilaza olish texnologiyasi

2.3 Madaniy muhitni tayyorlash va sterilizatsiya qilish

fermentlarni ozuqaviy etishtirish sterilizatsiyasi

Aspergillus, glyukoamilaza ishlab chiqaruvchilari tipik aeroblardir, shuning uchun ular faqat qattiq yoki suyuq muhit yuzasida yoki suyuq, etarli darajada gazlangan muhitda rivojlanishi mumkin. Ko'pchilik Aspergillus uchun optimal harorat 25-30 ° C, ba'zilari uchun - 35 ° C gacha. Ular uchun atrof-muhitning optimal namligi taxminan 65% ni tashkil qiladi.

Suv ostida etishtirish bilan mikroorganizmlar suyuq ozuqa muhitining butun hajmida rivojlanadi. Taqdim etilgan ferment ishlab chiqaruvchisi qattiq aerob bo'lganligi sababli, muhit intensiv ravishda gazlanadi. Mikroorganizmlarda bir-biri bilan chambarchas bog'liq ikkita jarayon - biomassa sintezi va fermentlar sintezi sodir bo'ladi.

Fermentlarning maksimal to'planishi uchun ozuqa muhitining ma'lum bir tarkibi, havoni kislorod bilan ta'minlash, metabolitlarni va fiziologik issiqlikni o'z vaqtida olib tashlash, optimal pH va harorat qiymatlari talab qilinadi. Eng muhim shart, shuningdek, ozuqa muhiti, etkazib beriladigan havo, fermentatorlar, quvurlar va armaturalarning sterilligi.

Suv ostida etishtirish uchun qattiq komponentlar aralashmasini o'z ichiga olgan suyuq ozuqa vositalaridan foydalaniladi. Kepak, novdalar, makkajo'xori keki, kleykovina, lavlagi pulpasi, alkogolli gazsiz qo'shilgan tabiiy xom ashyoga asoslangan murakkab ozuqaviy muhitda katta bo'laklar yo'qligiga ishonch hosil qiling, chunki ular sterilizatsiyani murakkablashtiradi va kommunikatsiyalarning tiqilib qolishiga olib kelishi mumkin. Shuning uchun, aralashtirishdan oldin, qattiq komponentlarni elakdan o'tkazish yoki qo'pol filtrlash kerak.

Ozuqa muhitining suyuq qismi (suv yoki turg'un filtrat) ozuqa qatlamlari, oqsil gidrolizatlari, aminokislotalar, bios manbalari va turli uglevodlar bilan boyitiladi. Suyuq ozuqa muhitidagi quruq moddalar miqdori ishlab chiqaruvchi turiga va qabul qilingan etishtirish rejimiga qarab 1,5 dan 16% gacha o'zgarishi mumkin [18].

Suv ostida etishtirish sharoitida mog'orlangan zamburug'lar tomonidan amilolitik fermentlarni hosil qilish uchun, shuningdek, o'zgartirilgan Czapek muhiti bo'lgan turli xil ozuqaviy muhitlar taklif qilingan. Fermentlarning faolligini oshirish uchun tarkibida 6% kraxmal, natriy nitrat, Czapek muhitining tuz tarkibi va solod novdalarining suvli ekstrakti bo'lgan muhit taklif etiladi. Kelajakda tadqiqotchilar eriydigan kraxmalni makkajo'xori yoki javdar uni bilan almashtirish imkoniyatini aniqladilar.

Asp suv ostida etishtirish uchun. awamori (mavjud shtammlarning glyukoamilaza quvvati bo'yicha eng faol), ozuqa muhitining quyidagi tarkibi tavsiya etiladi: 3% makkajo'xori unini o'z ichiga olgan suvli eritma; 0,01% natriy nitrat (azot 0,15%); 0,05% magniy sulfat; 0,05% kaliy xlorid; 0,1% mononatriy fosfat va 0,001% temir sulfat [2].

Madaniy muhitni sterilizatsiya qilish ikki usulda amalga oshirilishi mumkin: davriy va doimiy. Partiya usuli laboratoriya sharoitida kichik hajmlar bilan ishlashda qo'llaniladi. Bu ancha uzoq davom etadi va doimiydan past haroratlarda sodir bo'ladi. Katta hajmlar uchun doimiy sterilizatsiya usuli qo'llaniladi. 140 - 145 ° S haroratda sodir bo'ladi va 1-10 daqiqa davomida saqlanadi. Uzluksiz sterilizatorlarning bir nechta dizaynlari taklif qilingan. Ushbu turdagi barcha qurilmalar uchun umumiy jarayonning uch bosqichga bo'linishi va ularning har birini alohida qurilmada oqimda o'tkazishdir. Muhit sterilizatsiya haroratiga qadar qizdiriladigan birinchi apparat sterilizator, isitish ustuni yoki madaniy muhitni sterilizatsiya qilish uchun ustun deb ataladi (6-rasm, a). Ikkinchi qurilma, sterilizatsiya qilinadigan massa ma'lum bir sterilizatsiya haroratida saqlansa, bu saqlash davri deb ataladi. U sterilizatsiya vaqtini uzaytirish va mikrofloraning maksimal o'limiga erishish uchun mo'ljallangan (6-rasm, b, c). Uchinchi apparat steril ozuqa muhitini optimal emlash haroratiga sovutish uchun mo'ljallangan issiqlik almashtirgichdir [3].