Гипогликемическая активность пробиотиков на модели адренолиновой и алиментарной гипергликемии у крыс. Актуальность

Изучение физиолого-биохимических свойств штамма.
Тест на каталазную активность
Для выявления каталазной активности наносят каплю 10 %-го раствора пероксида на колонию или суспензию клеток. Выделение О2, хорошо заметно по образованию пузырьков газа, свидетельствует о продукции штаммами каталазы [16].
Предлагаемый штамм должен быть каталозоотрицательным.
Тест на продукцию лецитиназы.
Готовят бульон с яичным желтком: ¼ яичного желтка асептически вносят в 100 мл стерильного МПБ, хорошо размешивают, разливают в стерильные пробирки по 4—5 мл и выдерживают в термостате при 37 ⁰С в течение 24 ч для проверки на стерильность (среда в пробирках не должна мутнеть).
В пробирку с бульоном вносят 1 петлю суточной культуры с плотной питательной среды и инкубируют при 37 ⁰С в течение 24 ч. По истечении срока инкубации регистрируют наличие беловатой мути и всплывающих хлопьев, свидетельствующих о продукции микроорганизмом лецитиназы [16].
Предлагаемый штамм не должен продуцировать летициназу.
Тест на гемолизин.
В расплавленный и охлажденный до 48—50 ⁰С 1,5 % МПА прибавляют 5 % дефибринированной крови. После розлива среды в чашки Петри тонким слоем (1,5—2 мм) на застывшую и подсушенную поверхность штрихом делают посев 18-часовой культуры для получения изолированных колоний. Чашки инкубируют при температуре (37 ± 1) ⁰С в течение 24—48 ч, после чего проводят учет результатов.
Для предохранения гемолизинов от разрушения кислородом посев культуры штрихом можно вначале произвести на питательный агар без крови. Затем на первый слой наслоить 10 мл агара (при 48—50 ⁰С) с 5 % крови. Вокруг погруженных в агар колоний гемолиз проявляется более четко. В некоторых случаях гемолиз лучше выявляется, если после 24—48 - часовой инкубации чашек в термостате их помещают на 18—24 ч в холодильник [16].
Предлагаемые штаммы не должны давать зон гемолиза.
Ферменты, участвующие в обмене веществ.
Тест на продукцию желатиназы
К питательной среде добавляют желатин (из расчета 15 г на 100 мл), разливают в пробирки столбиком. Посев испытуемой культуры осуществляют уколом, погружая петлю с культурой вглубь питательной среды. Засеянную культуру инкубируют в термостате при оптимальной для нее температуре в течение 1—2 сут. Вместе с опытными пробирками в термостат ставят две пробирки с незасеянной культурой для контроля. При регистрации результатов учитывают интенсивность роста и форму разжижения желатиновой среды [16].
Тест на продукцию амилазы
Картофельный агар разливают по 10 мл в стерильные чашки Петри. После застывания агара культуру засевают штрихом, инкубируют в термостате при 37 С в течение 24 ч. Культуру в чашках заливают 5 мл раствора Люголя. Наблюдают в течение 5 мин за появлением светлых зон вокруг посевов [16].