Gaz xromatografiyasi

Gaz xromatografiyasiga o'xshash ishlar

• 
  Gaz xromatografiyasi va metanoldagi etanolni ichki...
  

Yuklab olingHujjatni yuklab olishIsh haqida ma'lumotIsh haqida ma'lumot

• 
  Invertli gaz xromatografiyasi: usulning fizik va kimyoviy asoslari, qo'llanilishi ...
  

Yuklab olingHujjatni yuklab olishIsh haqida ma'lumotIsh haqida ma'lumot

• 
  ... va uning gaz xromatografiyasida moddalarni ajratish sifati bo'yicha parametrlari
  

Yuklab olingHujjatni yuklab olishIsh haqida ma'lumotIsh haqida ma'lumot

• 
  Xromatografik jarayonning fizik va kimyoviy asoslari
  

Yuklab olingHujjatni yuklab olishIsh haqida ma'lumotIsh haqida ma'lumot

• 
  Xromatografik tahlil usullari va ulardan ob'ektlarni tahlil qilishda foydalanish ...
  

Yuklab olingHujjatni yuklab olishIsh haqida ma'lumotIsh haqida ma'lumot

• 
  Atmosferaning ifloslanishini aniqlashning gaz xromatografik usuli
  

Yuklab olingHujjatni yuklab olishIsh haqida ma'lumotIsh haqida ma'lumot

• 
  Tovarlarning fizik-kimyoviy xossalari va sifatini nazorat qilish usullari
  

2-savol
Neft tarkibini aniqlash metodologiyasini ishlab chiqish ... Bug'lanish moslamasining (PTV) dasturlashtirilgan harorati bilan namunani joriy etish orqali uni takomillashtirish imkoniyatlari, ishlab chiqilgan ...

4-bo'limda ishlab chiqilgan massa spektrometrik detektor bilan gaz xromatografiyasi usuli batafsilroq ko'rib chiqiladi ... Men taklif qilaman.
Ukol gormonlar sifatini nazorat qilish Shuni ta'kidlash kerakki, steroidlarni tahlil qilishda turli xil analitik usullar qo'llaniladi: xromatografik (shu jumladan gaz, suyuqlik, ustun va yupqa qatlam xromatografiyasi), spektral, elektrokimyoviy ... Men taklif qilaman.
Misol tariqasida korxona xarajatlarini boshqarishdan foydalaning ...Kirish: Tarixiy shaklidan qat'i nazar, moddiy ne'matlar ishlab chiqarish jamiyatning mavjudligi va rivojlanishining asosidir. Ishlab chiqarish jarayoni odamlarning yoki mehnatning o'zi, mehnat ob'ektlari va mehnat vositalarining maqsadga muvofiq faoliyatini nazarda tutadi. taklif qilaman
Lizing shartnomasining fuqarolik-huquqiy xususiyatlari lizingdan alohida davlatlar ichida faol foydalanish, investitsiya inqirozini bartaraf etish uchun undan foydalanishning shoshilinch zarurligini ko'rsatib, Rossiya Federatsiyasida ushbu turdagi rivojlanishning dolzarbligidan dalolat beradi ... I. taklif qilish
Mehnatni rag'batlantirishni tashkil etish va takomillashtirish ... KORXONA FAOLIYATI MOLIYAVIY NATIJALARI TAHLILI VA UNNI TAQMONLASH YO'LLARI. 38 3.... DAVLAT TAHLILI VA MEHNATNI rag'batlantirish YO'LLARI.
Bozor iqtisodiyoti rivojlangan mamlakatlarda mehnatni boshqarishning motivatsion jihatlaridan keng foydalaniladi. taklif qilaman

Silika gel va uning yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida qo'llanilishi

Kirish
Zamonaviy sanoat va fanda sorbentlar orasida alohida o'rin kremniy kislotasining quritilgan jeli bo'lgan silikagelga tegishli. Qo'llash nuqtai nazaridan, silika jeli faol alumina va zeolitlardan sezilarli darajada oshadi. Kimyoviy inertlik, yuqori issiqlik barqarorligi, g'ovakli tuzilmani tartibga solish qulayligi - bu xususiyatlarning barchasi optimal tuzilish g'ovakliligi bilan yuqori o'ziga xos sirt maydoniga ega silikagel asosida sorbentlar, katalizatorlar va tashuvchilarni tayyorlashga imkon beradi.
Sorbent sifatida silikagelning eng muhim qo'llanilishidan biri bu HPLC.
Eksperimental asbob-uskunalar va asboblarning yuqori darajada rivojlanganligi tufayli zamonaviy HPLC yuqori darajadagi ishonchlilik va takrorlanuvchanlik bilan murakkab tahliliy muammolarni hal qilish imkonini beradi. Amaldagi uskunaning yuqori sifati bilan bir qatorda ajratish tizimini to'g'ri tanlash katta ahamiyatga ega. Inert sirtga va yuqori kimyoviy barqarorlikka ega bo'lgan yuqori toza sferik silikagel asosidagi sorbentlarning yangi avlodi analitik vazifalarni bajarish uchun optimal variantlarni topish va ko'plab usullarning samaradorligini oshirish imkonini beradi.
Hozirgi vaqtda mahalliy farmatsevtika sanoati amaliyotida texnologiya va mahsulot sifati bo'yicha xalqaro standartlar va GMP (Yaxshi ishlab chiqarish amaliyoti) standartlari faol joriy etilmoqda va shuning uchun farmatsevtika sanoatining analitik va preparativ suyuqlik xromatografiyasi tizimlariga bo'lgan ehtiyoji sezilarli darajada ortib bormoqda. HPLC uchun zamonaviy xromatografik tizimlar nafaqat xom ashyo va tayyor dori vositalarining sifatini nazorat qilish imkonini beradi, balki ular turli xil ta'sirga ega bo'lgan keng doiradagi dori vositalarining ko'p komponentli aralashmalarini ajratish va tozalash uchun texnologik jarayonlarda ham qo'llaniladi.
HPLC so'nggi o'n yil ichida mahalliy farmatsevtika sanoatida sof moddalar ishlab chiqarish bilan bog'liq to'plangan muammolarni hal qilishda katta yordam berishi mumkin. Bir tomondan, HPLC usuli nisbatan arzon, lekin ko'pincha past sifatli moddalarni, xususan, Osiyo mamlakatlarida sotib olingan moddalarni talab qilinadigan tozalik talablariga olib kelish imkonini beradi. Boshqa tomondan, dorivor moddalarni, shu jumladan sintetik va tabiiy peptidlarni va genetik muhandislik mahsulotlarini ishlab chiqarish va izolyatsiya qilish uchun yangi yoki rekonstruksiya qilingan texnologiyalar sanoat HPLC dan foydalanishga asoslangan.
Xromatografik ajratish jarayonining samaradorligi va tejamkorligiga sorbent sirtining inertligi, fraksiya tarkibining torligi, zarrachalar shakli, sanoat miqyosida mavjud bo'lgan fazalar soni va diapazoni kabi omillar ta'sir ko'rsatadi.
So'nggi o'n yil ichida sanoat HPLC sorbentlarining sifati sezilarli darajada o'zgardi. Ularni ishlab chiqarish texnologiyasi analitik HPLC uchun sorbentlar ishlab chiqarishda erishilgan eng yaxshi narsalarni to'playdi. Noto'g'ri shakldagi zarralari bo'lgan sorbentlar bozordan deyarli butunlay o'ta toza silikagel asosidagi sferik sorbentlar bilan almashtiriladi.
Mahalliy farmatsevtika ishlab chiqaruvchilarining so'nggi yillarda tahlil qilishning zamonaviy xromatografik usullariga va yuqori toza preparatlarni olishga bo'lgan qiziqishi bizga zamonaviy HPLC usullarini, ham analitik, ham sanoat, ishlab chiqarish va foydalanish amaliyotiga keng miqyosda ishlab chiqish va joriy etishga umid qilish imkonini beradi. farmatsevtika mahsulotlari. Tahlil va tozalash texnologiyalari uchun HPLC asosidagi usullardan amaliy foydalanish, shubhasiz, mahalliy asboblarni qayta tiklashga, yangi sorbentlar va ustunlarni ishlab chiqishga va xromatografiya usulining o'zini yanada rivojlantirishga olib keladi.
1. Adabiyotlarni tekshirish
1.1 Silikagelni amaliy qo'llashning asosiy yo'nalishlari
Eng amaliy jihatdan muhim kremniy birikmalaridan biri silikon dioksid SiO2 dir. Kremniy dioksidining o'ziga xos xususiyati kolloid eritmalar berish va silikagellar deb ataladigan suv bilan jellar hosil qilish tendentsiyasidir.
Silikagel - yuqori darajada rivojlangan ichki yuzasi bo'lgan quritilgan gözenekli kremniy kislotasi jeli. Bu xususiyat silikagelning eng qimmatli xususiyatlarini aniqlaydi - adsorbent, katalitik faol moddaning tashuvchisi va katalizator.
Silika jeli sanoatning turli sohalarida tobora ko'proq foydalanilmoqda. Silikagel yuzasining gidrofil xususiyatlari tufayli u ko'pincha havo [1-3], karbonat angidrid, vodorod, kislorod, azot, xlor va boshqa sanoat gazlarini quritish uchun ishlatiladi [4].
Silikagelning katta miqdordagi suvni o'ziga singdirish qobiliyati turli xil suyuqliklarni quritish uchun ham muhimdir, ayniqsa suvsizlanayotgan suyuqlik suvni yaxshi erimaydigan hollarda (masalan, freon kabi galogenli suyuqliklarni quritish [4]). Silika jellari, shuningdek, asbob-uskunalarni korroziyadan himoya qilish uchun qurituvchi sifatida xizmat qiladi.
Suv bilan bir qatorda silikagel ko'plab organik moddalarning bug'larini yaxshi so'rib oladi. Bu xususiyat qimmatli organik erituvchilar - benzin, benzol, efir, aseton va boshqalar bug'larini ushlash (qayta tiklash) uchun ishlatiladi. havodan, benzol gaz-koks pechlaridan, benzin tabiiy gazlardan [1–4].
Silikagelning suyuqlik fazasidan ko‘plab moddalarni o‘zlashtirish qobiliyati turli moylarni sanoatda tozalashda, shuningdek, neftdan yuqori polimerli smolali moddalarni tozalashda qo‘llaniladi [3, 4].
Silika gel ko'plab kimyoviy reaktsiyalarni katalizlaydi. Reaksiya suvning hosil bo'lishi yoki iste'moli bilan kechadigan hollarda, masalan, esterifikatsiya reaktsiyalarida, aromatik galogen hosilalarini mos keladigan fenollarga aylantirishda va hokazolarda sezilarli katalitik faollikni namoyon qiladi [4,5-7]. Shu bilan birga, u polimerlanish, kondensatsiya, oksidlanish, organik moddalarning qaytarilishi va boshqalar kabi boshqa ko'plab kimyoviy jarayonlarning umumiy katalizatoridir [8].
Silika gel eng keng tarqalgan katalizator tashuvchilardan biri bo'lib, ko'plab murakkab kontaktlarning tarkibiy qismidir. U turli xil katalitik faol moddalar - metallar Pt, Pd, Ni va boshqalar, oksidlar, kislotalar, asoslarning tashuvchisi sifatida oksidlanish, gidratlanish, gidrogenlash, polimerizatsiya, kondensatsiya va boshqa ko'plab reaktsiyalar uchun ishlatiladi [7].
So'nggi paytlarda silikagellar radioaktiv izotoplarni ajratish, sanoat chiqindi suvlarini turli metallar ionlaridan tozalash, radioaktiv moddalar bilan zaharlanishda tibbiy yordam ko'rsatish uchun ion almashinuvchi sifatida keng qo'llanilmoqda [4].
Silikagelga bo'lgan qiziqish undagi bir qator qimmatli fazilatlarning kombinatsiyasi bilan bog'liq: yuqori adsorbsiya qobiliyati, adsorbsiya ta'sirining selektivligi, adsorbsiya faolligini yo'qotmasdan ko'p regeneratsiyadan o'tish qobiliyati, donlarning nisbatan yuqori mustahkamligi, issiqlikka chidamliligi, imkoniyati. uni donador va kukun holida olish va hokazo.
Tabiiy g'ovakli materiallar (pomza, asbest) bilan solishtirganda silikagelning eng muhim afzalligi uning shakllanishi paytida tuzilishini o'zgartirish imkoniyatidir. Bu holat ayniqsa muhimdir, chunki silikagelning g'ovakligi darajasi va tabiati uni turli jarayonlarda qo'llash samaradorligini belgilaydi. Berilgan gözenekli tuzilishda adsorbsion faollik adsorbsiyalangan moddaning konsentratsiyasi va uning molekulalarining kattaligi bilan aniqlanadi.
Adsorbsiya va kataliz jarayonlarining samaradorligi silikagelning g'ovak tuzilishini oqilona tanlashga bog'liq bo'lib, uni tayyorlash shartlari bilan belgilanadi [4].
1.2 Silikagellarning genezisi va tuzilishi
Shishasimon silikagelni tayyorlash jarayoni kremniy kislotasining zolini olish va uni jellash, yetilish, sinerez, gelni yuvish va quritishdan iborat.
Kremniy kislota eritmasi turli usullar bilan olinadi: gidroksidi silikatning kislotalar yoki kislota tuzlari bilan o'zaro ta'siridan [4, 8]; kremniy tetrakloridning gidrolizi; kremniy kislotasining metil yoki etil efirlarini sovunlash; silan SiH4 ning suvli eritmada ozon bilan oksidlanishi; gidroksidi silikatlarni elektroliz qilish; natriy silikatning suvli eritmasini vodorod shaklida kation almashtirgich bilan to'ldirilgan ustun orqali o'tkazish [4]. Bu usullarning barchasi, birinchisidan tashqari, asosan laboratoriyada qo'llaniladi. Jahon sanoati asosan eruvchan shishadan sulfat kislota ta'sirida silikagel ishlab chiqaradi. Bu usul bilan kremniy kislotasini olish reaksiya bilan sxematik tarzda tasvirlangan
Na2SiO3 + H2SO4 → Na2SO4 + H2SiO3↓
Jarayonning birinchi bosqichi, tayyorlash usulidan qat'i nazar, haqiqiy erigan kremniy kislotasi SiO2 ning hosil bo'lishidir [4, 8]. Keyin oddiy kremniy kislotalar polisilik kislotalarga kondensatsiyalanadi, ularning molekulyar og'irligi asta-sekin ortadi. Polimerlanish jarayonining rivojlanishi kolloid eritma (sol) hosil bo'lishiga olib keladi [10, 11]. Polimerizatsiya jarayonining umumiy tenglamasi quyidagicha:
nSi(OH)4 → (SiO2)n + 2nN2O.

1.1-rasm. Silikagel skelet globullarining sxematik tuzilishi
Sol zarralari sharsimon bo'lib, tartibsiz o'ralgan kremniy-kislorodli tetraedralardan iborat bo'lib, ularning sirt qatlami gidroksillar bilan tugaydi. Bunday zarrachaning tuzilishi sxematik tarzda rasmda ko'rsatilgan. 1.1 [4].
Sol haqiqatan ham muvozanat tizimi emas va uning erkin energiyani kamaytirish tendentsiyasi zolning jelga o'z-o'zidan o'tishida namoyon bo'ladi. Hidrojel ham bir xil kondensatsiya jarayonlari natijasida vaqt o'tishi bilan o'zgarishlarga uchraydi, bu esa birlamchi zarrachalarning yanada kattalashishi va birlashishiga olib keladi.
Jellanish tezligi bir qator omillarga va birinchi navbatda kuldagi SiO2 kontsentratsiyasiga, haroratga, muhitning pH darajasiga va mineral kislotaning tabiatiga bog'liq.
Kremniy kislotasi jarayonining jelleşme mexanizmi hali to'liq o'rganilmagan. Eng keng tarqalgan va e'tirof etilgani miselyar yoki fibrilyar nazariyadir [4], unga ko'ra gel past molekulyar og'irlikdagi kremniy kislotalarning ketma-ket kimyoviy kondensatsiyasi natijasida hosil bo'ladi va suvning chiqishi bilan birga keladi. Kondensatsiyalangan polisilikat kislotalarning zanjirlari, o'z navbatida, o'zaro bog'langan bo'lib, kapillyar kuchlar ta'sirida ko'p miqdorda suv yoki suyultirilgan silikat eritmasini ushlab turishga qodir elastik struktura hosil qiladi. Ushbu gipotezaga ko'ra, butun jelga o'xshash tizimning strukturaviy asosini o'zaro bog'langan yuqori polimer zarralari tashkil etadi.
Jel hosil bo'lishining kondensatsiya mexanizmi boshqalarga qaraganda kolloid kremniy kislotasining bunday xususiyatlarini yaxshiroq tushuntiradi, masalan, zolning tuzlarning kichik qo'shimchalariga befarqligi, vodorod ionlari konsentratsiyasining jelleşme tezligiga ta'siri, jelning qaytarilmasligi, elastikligi va boshqalar [4. , 8].
Jel olish jarayonini quyidagi sxema bo'yicha tasvirlash mumkin [4]:
Si(OH)4 polimerizatsiyasi kolloid zarralar (sol) zarrachalar yig'ish tarmog'i (gel)
Birinchi bosqichda Si(OH)4 molekulalari bog'lar hosil bo'lishi bilan kolloid zarrachalar hajmiga kondensatsiyalanadi.
Ikkinchi bosqichda birlamchi zarralar orasidagi bir xil kondensatsiya jel hosil bo'lishiga olib keladi. Bu bosqichlar orasidagi farq shundan iboratki, birinchi bosqichda kondensatsiya uzluksiz massiv kremniy zarrachalariga olib keladi, ikkinchi bosqichda ular faqat ba'zi joylarda birlashadi. Bu butun muhit bo'ylab cho'zilgan juda ochiq, ammo doimiy skeletga olib keladi va shuning uchun butun tizimga ma'lum darajada qattiqlik beradi.
Plank gipotezasi [4] silikagelning g'ovak strukturasini hosil qilish nazariyasi uchun alohida qiziqish uyg'otadi. Boshqa ko'plab tadqiqotchilar singari, Plank kremniy kislotalarining jellanishi kremniy atomlari o'rtasida kislorod ko'priklarining paydo bo'lishi bilan kondensatsiya reaktsiyasiga asoslanganligini taklif qiladi. Biroq, bu reaktsiyadan oldin vodorod bog'lanishining oraliq bosqichi sodir bo'ladi. Ushbu nuqtai nazardan jelatsiyaning rasmi quyidagicha taqdim etiladi. Birinchi bosqichda uch o'lchovli fazoviy tarmoqda o'zaro bog'langan qisqa SiO2 zanjirlaridan iborat mitsellalar (sferik shakldagi birlamchi zarralar) hosil bo'ladi. Miselda qisqa zanjirlarni bog'lovchi bog'lar vodorod bog'lari (nitramitselyar bog'lar) deb taxmin qilinadi.

Misellalar suv molekulalari orqali vodorod bog'lari orqali koagulyatsiya jarayonida zanjirlar bilan bog'lanib, tuzilishni hosil qiladi (mecelalararo aloqalar):

Gidrojelning gellanish, sinerezis va yuvilishi bosqichlarida ikkala turdagi bog'larning mustahkamligiga ta'sir ko'rsatish orqali birlamchi zarrachalar va mitselyar zanjirlarning o'lchamlarini va shuning uchun silikagelning tuzilishini nazorat qilish mumkin. Shunday qilib, mitsellalar orasidagi vodorod aloqalarining uzilishiga sabab bo'lgan har qanday omil (miselyarlararo aloqalarning peptizatsiyasi) qisqa miselyar zanjirlarning shakllanishiga olib keladi. Natijada, ular zichroq o'rashga yo'naltiriladi va nozik gözenekli silika jeli olinadi. Intramitselyar aloqalarning peptizatsiyasi bir xil yo'nalishda ta'sir qiladi, bu esa zarrachalar hajmining pasayishiga olib keladi. Shunday qilib, Plank va Drake [4] silikagelning g'ovak tuzilishi jelni tashkil etuvchi zarrachalarning o'lchami va qadoqlash zichligi bilan belgilanadi degan xulosaga kelishdi.

Yuqoridagilarni umumlashtirib, silikagel tuzilishining korpuskulyar nazariyasining asosiy qoidalarini quyidagicha shakllantirish mumkin:
-kremniy kislotasining kondensatsiyasi jarayonida o'sib chiqadigan polimerlar zanjir va kremniy-kislorodli tetraedr tarmoqlari bilan birgalikda sharsimon zarrachalarga aylanadi;
- bu zarralar zol - gel - silikagel o'zgarishi bosqichlarida o'z individualligini yo'qotmaydi;
-silicagellar bir-biriga tutash sferik zarrachalar tizimi bo'lib, ularning hajmi va qadoqlash zichligi tayyorlash usuliga bog'liq;
-g'ovaklik silikagelni tashkil etuvchi zarrachalarning kattaligi va qadoqlash zichligi bilan aniqlanadi.
Silikagelning geometrik tuzilishi uning adsorbsion faolligini belgilovchi yagona omil emas. Bunda uning sirtining kimyoviy tabiati muhim rol o'ynaydi, bu termal suvsizlanish, silikagel yuzasida turli reaktsiyalarni amalga oshirish, yangi birikmalar berish orqali o'zgarishi mumkin. Bunday reaktsiyalarga alkoksillanish, xlorlash, silikagel sirtining alkil- va arilxlorosilanlar bilan o'zaro ta'siri va boshqalar kiradi.
Ba'zi moddalarning adsorbsiyasiga nisbatan silikagelning o'ziga xosligini berish uni qo'llash doirasini sezilarli darajada kengaytiradi. Shu munosabat bilan silikagellarni turli funktsional guruhlarga ega bo'lgan organik radikallar bilan kimyoviy modifikatsiya qilish istiqbolli.
1.3 Kimyoviy modifikatsiyalangan silikagellar
Silikagellarning adsorbsion xossalari strukturasining geometriyasi va g'ovakligi bilan bir qatorda ko'p jihatdan ularning sirtining kimyoviy tabiatiga bog'liq.
Silikagellarning yuzasi gidroksil guruhlari bilan qoplangan. Silikagellarning adsorbsiyasi va boshqa xossalari ularning yuzasida gidroksil guruhlarning miqdori va konsentratsiyasiga bog'liq. Termik degidratatsiya, regidratsiya yoki gidroksillarning turli atomlar yoki organik radikallar bilan almashinishi natijasida silikagellar sirtining kimyoviy tabiatining oʻzgarishi silikagelning adsorbsion va texnologik xossalarining keskin oʻzgarishiga olib keladi.
Kremniyning elektron d-qobig'i to'ldirilmaganligi sababli, silikagel sirtining gidroksil guruhlarida elektron zichligi taqsimoti shunday bo'ladiki, ulardagi manfiy zaryad kislorod atomiga kuchli siljiydi va vodorod atomi. qisman protonlanib, protik kislota markazini hosil qiladi [12]. Bu silikagel yuzasining atrof-muhitda to'plangan elektron zichligi bo'lgan molekulalarning bog'lari yoki aloqalari bilan o'ziga xos o'zaro ta'sirini ta'minlaydi [12]. Shu sababli, silikagelning gidroksil guruhlarini qisman yoki to'liq ftor atomlari yoki organik radikallar bilan almashtirish bilan, gidroksillarning barchasi yoki bir qismi adsorbsiya jarayonidan chetlatilganligi sababli, moddalarning adsorbsiyasining pasayishi tabiiydir. donor-akseptor komponenti adsorbsion o'zaro ta'sirda rol o'ynaydi.
Silikagellar sirtini aniq belgilangan asosiy yoki kislotali xossalarga ega bo'lgan organik radikallar bilan o'zgartirish kislotali yoki asosli moddalarni tanlab yutuvchi maxsus adsorbentlarni ishlab chiqarishga olib keladi, ular uchun bunday radikallar faol adsorbsiya markazlari hisoblanadi. Funktsional guruhlarga ega modifikatsiyalangan silikagellarning adsorbsion xossalarining tabiati ham radikallarning kattaligi, ham uning kimyoviy xossalari bilan belgilanadi.
Kimyoviy tahlilda kimyoviy modifikatsiyalangan silikagellarni qo'llash sohalaridan biri HPLC hisoblanadi.

1.4 Xromatografik tahlil usullarida silikagel asosidagi sorbentlardan foydalanish

Xromatografiya - aralashmaning tarkibiy qismlarini bir-biriga aralashmaydigan ikkita faza o'rtasidagi muvozanat taqsimotidagi farqga asoslangan holda ajratish usuli, ulardan biri statsionar, ikkinchisi harakatchan. Komponentning statsionar fazaga yaqinligi qanchalik kuchli bo'lsa, u shunchalik kuchli sorblanadi va sorbentda shunchalik uzoq vaqt qoladi; mobil faza bilan birga uning rivojlanishi sekinroq. Aralashmaning tarkibiy qismlari sorbentga turli xil yaqinliklarga ega bo'lganligi sababli, aralashma sorbent bo'ylab harakat qilganda, ajralish sodir bo'ladi: ba'zi komponentlar yo'lning boshida qoladi, boshqalari esa oldinga siljiydi. Xromatografik jarayon termodinamik (fazalar orasidagi muvozanatni o'rnatish) va kinetik (komponentlarning turli tezliklarda harakati) jihatlarini birlashtiradi.
Xromatografiyaning turli usullarini fazalarning agregatsiya holatiga, ajratish mexanizmiga, jarayonni asbob-uskunalar bilan jihozlanishiga (shakl bo'yicha) va xromatografiya qilinayotgan harakatlanuvchi faza va aralashmaning harakatlanish usuliga ko'ra tasniflash mumkin [13].
Fazalarning birikish holatiga ko'ra suyuq va gaz xromatografiyasi farqlanadi.
Amalga oshirish texnikasiga ko'ra, xromatografiya ustunli (moddalarni ajratish maxsus ustunlarda amalga oshiriladi) va planarga bo'linadi: yupqa qatlamli va qog'oz. Yupqa qatlamli xromatografiyada ajratish yupqa sorbent qatlamida, qog'oz xromatografiyasida, maxsus qog'ozda amalga oshiriladi.
Xromatografiya usul sifatida 1903 yilda rus botanigi M.S. Rang o'simlik pigmentlarini bo'r kukuni bilan to'ldirilgan ustunlarga ajratish uchun ishlatiladi [14]. Pigmentlar neft efiri bilan yuvilganda, ular turli rangdagi halqalarga bo'linib, ustun bo'ylab harakatlanishdi. Usul juda qulay bo'lib chiqdi va keyinchalik Rangli xromatografiya (rangli bo'yash) deb nomlandi.
Xromatografik tahlilning ko'plab usullarini jadal rivojlantirishning boshlang'ich nuqtasi Nobel mukofoti sovrindorlari A. Martin va R. Sinjlarning ishlaridir. Ular boʻlinish xromatografiya usulini taklif qildilar va ishlab chiqdilar (1941). 1952 yilda A. Martin va L. Jeyms gaz-suyuqlik xromatografiyasi sohasida birinchi natijalarni oldi. Ushbu ishlar gaz xromatografiyasi usulini ishlab chiqishga qaratilgan ko'plab tadqiqotlarni keltirib chiqardi.
Qisqa vaqt ichida namunali inyeksiya tizimlarining konstruksiyalari takomillashtirildi, sezgir detektorlar yaratildi. Gaz xromatografiyasi usuli xromatografik usullardan birinchisi hisoblanadi. Agar 1950-1960-yillarda yupqa qatlamli xromatografiya usullari (qog'oz va yupqa qatlam) ko'p jihatdan ustunli xromatografiyani tezroq, qulayroq va sodda qilib almashtirgan bo'lsa, 70-yillar aynan yuqori samarali (instrumental) suyuqlik xromatografiyasida ulkan taraqqiyot bilan tavsiflanadi. jarayonni tezlashtirish uchun xromatografiya bosim ostida amalga oshiriladi.
Hozirgi vaqtda HPLC nafaqat klassik ustun, qog'oz va yupqa qatlamli xromatografiyani (keyingi o'rinlarda TLC deb yuritiladi), balki rivojlanish sur'atlari bo'yicha gaz xromatografiyasini ham ortda qoldirdi. HPLC dan foydalanishning jadal o'sishi alohida birliklar (nasoslar, injektorlar, detektorlar) va to'liq suyuqlik xromatograflarini ishlab chiqish va seriyali ishlab chiqarish bilan bog'liq. HPLC ning nazariy asoslarini ishlab chiqish, HPLC uchun yuqori toza erituvchilar va kimyoviy moddalar ishlab chiqarishni tashkil etish ham muhim rol o'ynadi. Silikagel asosida don o'lchami 3 dan 10 mkm gacha bo'lgan tor dispersli sorbentlarni, shu jumladan kimyoviy payvandlangan statsionar fazalarni ishlab chiqarishni tashkil etish va ular bilan yuqori samarali HPLC ustunlarini to'ldirish usullarini ishlab chiqish alohida e'tiborga loyiqdir. ].
HPLC ning jadal rivojlanishining bir qancha sabablari bor. Avvalo, ishlay oladigan moddalarning molekulyar massalarining keng doirasini nomlash kerak: bir necha birlikdan o'n milliongacha, bu gaz xromatografiyasiga qaraganda ancha kengroqdir. Bundan tashqari, HPLC sharoitlarining yumshoqligi (deyarli barcha ajralishlar xona haroratiga yaqin haroratlarda, havo bilan aloqa bo'lmaganda amalga oshirilishi mumkin) uni labil birikmalarni o'rganish uchun ayniqsa mos va ko'pincha yagona usulga aylantiradi, xususan. , biologik faol moddalar va biopolimerlar [17].
Tahlilning turli usullari orasida HPLC bir vaqtning o'zida ajratish, identifikatsiya qilish va aniqlash funktsiyalarini amalga oshirish tufayli ma'lumotlarning eng yuqori darajasi bilan ajralib turadi; selektivlik; aniqlashning past chegarasi, shuningdek, ajratish, aniqlash va miqdorni aniqlash jarayonini avtomatlashtirish va kompyuterlashtirish imkoniyati. Tahlilning xromatografik usuli universal bo'lib, turli xil o'rganish ob'ektlari (neft, dori vositalari, o'simlik va hayvonot manbalari, biologik suyuqliklar, oziq-ovqat mahsulotlari va boshqalar) uchun qo'llaniladi [17].
Tahlil qilingan yoki ajratilgan moddalarni ajratish mexanizmiga ko'ra, HPLC quyidagilarga bo'linadi: adsorbsiya; tarqatish; ion almashinuvi; eksklyuziv [17].
HPLC bo'limida ajralish statsionar fazada ajratilishi kerak bo'lgan moddalarning turli xil eruvchanligi tufayli sodir bo'ladi, odatda statsionar tashuvchining yuzasiga kimyoviy payvandlangan (o'zgartirilgan) va erituvchidagi harakatchan faza. Bu ajratish usuli, ayniqsa, bog'langan faza qutbsiz C8 dan C18 alkil qoldig'i bo'lsa va harakatchan faza ko'proq qutbli bo'lsa, masalan, metanol yoki asetonitrilning suv bilan aralashmasi eng mashhurdir. Ushbu variant bilan teskari fazali (yoki teskari faza yoki fazalarni teskari o'zgartirish) xromatografiya hozirgi vaqtda HPLCdagi ajralishlarning uchdan ikki qismidan iborat. "teskari fazali HPLC" atamasi klassik adsorbsion versiyadagiga nisbatan qarama-qarshi ma'nodan kelib chiqqan holda, sorbent va erituvchining qutbliligi nisbati: qutbli sorbent va adsorbsiya uchun qutb bo'lmagan mobil faza va,
Ion almashinadigan xromatografiyada eritmadagi kationlar va anionlarga ajralgan moddalar aralashmasi molekulalari sorbent orqali harakatlanayotganda ajratiladi, uning yuzasida kation yoki anion markazlari payvandlanadi, ular tahlil qilinayotgan ionlar bilan almashinishga qodir. moddalarning almashinuv kurslari turlicha bo‘lganligi sababli [19].
Hajmi-ekklyuzion (elak, gel-penetratsiya, gel-filtratsiya) xromatografiyasida moddalar molekulalari tashuvchining teshiklariga o'tish qobiliyatining har xilligi tufayli o'lchamlari bo'yicha ajratiladi. Bunday holda, qo'llab-quvvatlovchi teshiklarning minimal soniga kirishga qodir bo'lgan eng katta molekulalar (eng yuqori molekulyar og'irlikdagi) ustunni birinchi bo'lib tark etadi. Kichik molekulyar o'lchamdagi moddalar sorbentning teshiklariga erkin kirib, oxirgi bo'lib chiqadi [17].
Ko'pgina HPLC ajralishlari moddalarning sorbent bilan o'zaro ta'sirining aralash mexanizmiga asoslanadi, bu esa ustundagi komponentlarning ko'proq yoki kamroq saqlanishini ta'minlaydi.
HPLC uchun ishlatiladigan sorbentlar bir nechta guruhlarga bo'linadi, ularning har biri o'z navbatida turlarga bo'linadi. Ma'lumki, sorbentlar sorbent matritsasi (asos) ning kimyoviy tabiatiga ko'ra va turlari bo'yicha - matritsaga kimyoviy ishlov berish usuliga ko'ra guruhlarga bo'linadi, bu esa uni ma'lum bir sharoitda foydalanishga yaroqli qiladi. xromatografiya turi.
Sorbentlarning asosiy guruhlari quyidagilardan iborat: 1) sirt g'ovakli sorbentlar, ular erituvchini o'tkazmaydigan qattiq shisha yadro bo'lib, uning yuzasiga yupqa qatlamli g'ovakli changni yutish, odatda silikagel qo'yiladi; 2) silikagel asosidagi g'ovakli sorbentlar; 3) alyuminiy oksidi asosidagi g'ovakli sorbentlar; 4) poroz polimer asosidagi sorbentlar.
Birinchi guruh sorbentlari tarixan birinchi bo'lib HPLC ning tez o'sishini rag'batlantirgan. Ular 35-50 mkm o'lchamdagi shisha mikrobalonlar bo'lib, ularning yuzasiga 1-2 mikron qalinlikdagi silikagel yoki alyuminiy oksidi qatlami turli usullar bilan mahkamlanadi. Yuzaki gözenekli sorbentlarning afzalliklari (quruq usulda ustunlarga qadoqlash imkoniyati, fraksiyalashning qulayligi, payvandlangan va tayanchli fazalarning keng doirasi) bilan bir qatorda jiddiy kamchiliklari ham aniqlandi. Ularning asosiylari kolonnadagi sorbentning kichik yuzasi bilan bog'liq past namuna sig'imi (sorbentning asosiy hajmini ajratishda ishtirok etmaydigan g'ovak bo'lmagan yadro egallaydi), uzoq vaqt davomida yuqori gidravlik qarshilik hisobga olinishi kerak. ustunlar, ularning past mahsuldorligi, sorbentlarni olishning murakkab texnologiyasi va ularning yuqori narxi;
Hozirgi vaqtda analitik ishlar uchun sirt g'ovakli sorbentlar amalda qo'llanilmaydi. Endi ular uchun qo'llanilishning yagona sohasi - bu oldingi ustunlarda foydalanish. Namunalardan qaytarilmas sorbsiyalangan ifloslantiruvchi moddalarni olish uchun analitik ustun oldiga oldingi ustunlar o'rnatiladi.
HPLC ning keyingi jadal rivojlanishi sorbentlarning yangi avlodiga asoslangan edi: diametri 3 dan 10 mkm gacha bo'lgan mikrozarralar, asosan silikagel, qisman alyuminiy oksidi va yaqinda g'ovakli polimerlar asosida.
Silikagel har doim katta yoki kichikroq miqdorda adsorbsiyalangan suvni o'z ichiga oladi. Bundan tashqari, texnik silikagel tarkibida boshqa oksidlar, birinchi navbatda alumina oksidi, shuningdek, temir oksidi mavjud bo'lib, texnik silikagelga sarg'ish yoki hatto jigarrang rang beradi. Silikagel o'zgaruvchan sirt maydoniga ega, odatda 100-600 m2 / g va diametri 5 dan 15 nm gacha bo'lgan ustunlikdagi g'ovaklarning sezilarli hajmiga (0,5-1,2 ml / g) ega.
Silika jeli uning tozaligi va boshqa xususiyatlarini o'zgartirish uchun turli usullar bilan tayyorlanadi. Eng keng tarqalgani, polisilikat kislotaning natriy tuzi bo'lgan suyuq shishadan silikagelni kislotalar bilan ishlov berish, so'ngra hosil bo'lgan polisilikat kislotasini quritish, hosil bo'lgan bo'lakli silikagelni sindirish va izolyatsiyalash usulidir. sochilish orqali kerakli kasr. Ushbu usul tarixan birinchi bo'lib kolonna (klassik) va yupqa qatlamli xromatografiyada ishlatiladigan silikagelni olish uchun ishlatilgan. Xuddi shu silika jeli asosida Partisil (Vatman) va Lichrosorb (Merck) kabi HPLC uchun maxsus sorbentlar olingan. Ular TLC [17] uchun maxsus mo'ljallangan silikagel havo separatorlarida ajratish yo'li bilan olingan.
Keyinchalik, 3-12 mkm o'lchamdagi zarrachalar (DuPont, Merck, Machery-Nagel, fazalarni ajratish, ajratish) kerakli fraktsiyadagi silikagel mikrosferalarini sintez qilish jarayonida yo'naltirilgan shakllantirish orqali maxsus HPLC uchun silikagellarni olish usullari ishlab chiqildi. Group, Shandon Southern va boshqalar) mos ravishda Zorbax, Lichrosphere, Nucleosil, Spherisorb, Vidak, Hypersil savdo belgilari ostida. Zorbax tovar belgisining silikagelini hosil qilish bosqichlari rasmda ko'rsatilgan. 1.2 [15].

1.2-rasm. Zorbax-Rx-SIL sorbentining hosil bo'lish bosqichlari
Hozirgi vaqtda turli kompaniyalar silikagel asosidagi 200 dan ortiq HPLC sorbentlarini ham tartibsiz zarrachalar, ham mikrosferalar shaklida ishlab chiqaradilar. Ularning diapazoni HPLC uchun taniqli silikagellarga yangi payvandlangan fazalar yoki bir xil fazalarni payvandlashning yangi variantlari paydo bo'lishi, kengroq gözenekler yoki torroq ajratilgan yangi silikagel matritsalarining paydo bo'lishi tufayli doimiy ravishda kengayib bormoqda. yangi ishlab chiqaruvchilar [15, 17].
HPLC uchun silikagelning sirt kimyosi, uni tayyorlash usulidan qat'i nazar, taxminan bir xil. Shaklda. 1.3 [17] sxematik ravishda silikagelning sirt qatlamini ko'rsatadi, u keyinchalik adsorbent vazifasini bajaradi yoki kimyoviy statsionar faza payvand qilinadigan matritsa bo'lib xizmat qiladi. Silikagel yuzasida keyingi xromatografik tahlil paytida yoki statsionar fazali payvandlashda moddalar bilan o'zaro ta'sir o'tkazishga qodir bo'lgan bir necha turdagi guruhlarni topish mumkin. Avvalo, bu erkin gidroksil (I turdagi) bo'lgan silanol guruhi bo'lishi mumkin. Ikkinchidan, bu silanol guruhi bo'lishi mumkin, uning erkin gidroksili o'zining yolg'iz elektron juftligi tufayli qo'shni kislorod atomi bilan vodorod aloqasini (II turdagi) hosil qiladi va shu bilan barqaror olti a'zoli tsiklni hosil qiladi. Uchinchidan, bu siloksan ko'prigi bo'lishi mumkin, ikkita silanol guruhidan suv molekulasini yo'q qilish natijasida hosil bo'ladi (III tip). Oxirgi turdagi bog'lanish teskari gidroliz reaktsiyasi tufayli ikkita silanol guruhiga (I tip) aylanishi mumkin.

1.3-rasm. Silikagel yuzasidagi guruhlar: I, erkin silanol guruhi; II - silanol, vodorod bilan bog'langan; III - siloksan
Silikagelning massa birligiga silanol va siloksan guruhlari soni bir qator omillarga bog'liq. Shunday qilib, silikagelning o'ziga xos yuzasi qanchalik katta bo'lsa (u 1000 dan 15 m2 / g gacha o'zgarib turadi), kolonnadagi sorbentda ikkala turdagi guruhlar shunchalik ko'p joylashadi va shuning uchun ular bilan o'zaro ta'sir qiluvchi moddalarni ushlab turish kuchliroq bo'ladi. 17].
Silikagel yuzasida siloksan va silanol guruhlarining nisbati uni tayyorlash vaqtida quritish muddati va shartlariga bog'liq. Silikagel uchun dastlabki mahsulotning polisilikat kislotasi jelini quritganda, polikondensatsiya birinchi navbatda suvning chiqishi va silikagelning qattiq skeletining shakllanishi bilan sodir bo'ladi. 200 ° S ga qizdirilganda, barcha fizik sorblangan suv chiqariladi va sirt butunlay gidroksillangan bo'lib qoladi; silanol guruhlari soni maksimal, siloksan guruhlari esa minimal bo'ladi [15, 17]. Agar siz isitishni davom ettirsangiz, silanol guruhlari siloksan guruhlarini hosil qilish uchun suvni ajratishni boshlaydi; bu jarayon taxminan 1000°C da tugaydi.
Silikagel yuzasida joylashgan silanol guruhlari ozgina kislotali xususiyatlarga ega va shuning uchun asosiy xususiyatlarga ega bo'lgan moddalarni kuchliroq ushlab turishga qodir. Siloksan guruhlari gidroliz tufayli ish paytida silanol guruhlariga aylanishi mumkin, bu sorbent sirtining xususiyatlarini va moddalarni ushlab turishini o'zgartiradi [15, 17].
Xromatografiya uchun ishlatiladigan alumina yuzasi va tuzilishi silikagelnikiga o'xshaydi, lekin ular bir xil emas va ba'zi hollarda silikagelnikidan farq qiladigan selektivlikni ta'minlaydi. Biroq, HPLCda aluminadan foydalanish cheklangan. Buning sababi shundaki, sorbentlar ishlab chiqaruvchilarning hammasi ham alyuminiy oksidi mikrozarrachalarini ishlab chiqarmaydi va shu asosda payvandlangan fazalar umuman ishlab chiqarilmaydi. Biroq, ba'zi hollarda selektivlik silikagelnikidan farqli bo'lgan hollarda alumina ishlatiladi [17].
Kimyoviy bog'langan fazalari silikagel asosidagi sorbentlar fizik qo'llaniladigan statsionar faza (alohida moddalar yoki ko'pincha turli xil tuzilish va qutbli polimerlar shaklida) sorbentlarga qaraganda kechroq paydo bo'ldi. Qo'llaniladigan faza erituvchi tomonidan juda tez yuviladi (bug'lanishdan yoki gaz-suyuqlik xromatografiyasida o'zgarishlardan ancha tezroq), ushlab turish parametrlari doimiy ravishda o'zgarib turadi va preparat bilan to'plangan fraktsiyalar faza bilan ifloslanadi. Statsionar faza bilan to'yingan erituvchidan foydalanish bunday sorbentlar va ustunlarning barqarorligini biroz oshirishga imkon berdi, ammo kamchiliklarning aksariyati saqlanib qoldi.
Ushbu muammolarni organik statsionar fazani silikagel matritsasiga kimyoviy payvandlash orqali hal qilish mumkin. Silikagel yuzasida (ayniqsa, to'liq gidroksillangan) ko'p miqdorda mavjud bo'lgan silanol guruhlari ozgina kislotali xususiyatlarga ega va ko'plab reaktsiyalarga juda oson kiradi. Shu tarzda olingan payvand fazali sorbentlarning birinchisi "cho'tka" (payvandlangan molekulalar, cho'tkadagi cho'tkalar kabi, silikagel yuzasini qoplagan) silanollarni spirtlar bilan esterlashtirib, efir bog'ini hosil qilish orqali tayyorlangan. . Biroq, reaksiyaning teskariligi, ayniqsa kislotali va ishqoriy muhitda va suvli harakatlanuvchi fazalar mavjud bo'lganda, bunday sorbentlarning xizmat qilish muddatini ham, ularni qo'llash sohalarini ham katta darajada cheklab qo'ydi. Keyinchalik ancha kuchli va gidrolizga chidamli Si-O-Si va Si-C bog'lanishlaridan foydalangan holda har xil turdagi bog'langan fazalarni olish usullari ishlab chiqildi. Savdoda mavjud bo'lgan deyarli barcha greft fazali sorbentlar bu turdagi bo'lib, ularning 200 dan ortiqlari mavjud [15, 17].
Payvandlangan fazali sorbentlar yuqori narxga qaramay, hozirda eng mashhur hisoblanadi. HPLC ajratishning 60% dan ortig'i faqat teskari fazali payvandlangan sorbentlar yordamida amalga oshiriladi, ularning asosiysi C18 payvandlangan fazali sorbentdir.
Silikagel asosidagi payvandlangan sorbentlardan ustun foydalanishni ta'minlaydigan quyidagi afzalliklarni qayd etish mumkin: yuqori bosimga mexanik qarshilik; xromatografik ajratish vaqtida bog'langan fazaning erituvchiga o'tishining yo'qligi (agar bog'langan fazani kimyoviy yo'q qilishga olib keladigan reaktsiyalar bo'lmasa); erituvchilarga, haroratga, suvga, pHga qarshilik; payvandlash, qo'shimcha kimyoviy ishlov berish va erituvchini almashtirish darajasini o'zgartirish orqali keng diapazonda selektivlikni o'zgartirish qobiliyati.

2. Eksperimental qism

2.1 Eksperimental usulni tanlash va tavsifi
Kurs ishining maqsadi teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi yordamida silikagel asosidagi sorbentlarning xossalarining strukturaning g'ovakligi va sirtning kimyoviy tabiatiga ("payvandlangan faza") bog'liqligini eksperimental o'rganishdir. (keyingi o'rinlarda RP HPLC deb yuritiladi).
RP HPLC payvandlangan qutbsiz (odatda uzoq alkil yoki alkilsilil) guruhlari va qutbli erituvchiga ega sorbentdan foydalanadigan bo'linish xromatografiyasining variantidir.
RP HPLC usuli bo'yicha tahlillarni o'tkazishda xromatografik ustun ajratiladigan moddalarning har qandayiga qaraganda kamroq sorbsiya qobiliyatiga ega bo'lgan mobil faza bilan yuviladi. Bunda statsionar faza qatlamiga kiritilgan mobil faza eluent deb ataladi va ustundan chiqib ketadigan va ajratilgan komponentlarni o'z ichiga olgan mobil faza eluat deb ataladi. Yuvilgandan so'ng, elyuentda erigan ajraladigan moddalar kolonaga kiritiladi va elyuent doimiy ravishda o'tkaziladi (elutsiya jarayoni). Ajraladigan moddalar kolonna bo'ylab so'rib olish qobiliyatiga mos ravishda har xil tezlikda harakatlanadi. Agar komponentlarning harakat tezligi etarlicha farq qiladigan bo'lsa, u holda ustunning chiqishida eng kam so'rilgan komponent avval eluat bilan birga paydo bo'ladi, keyin keyingi komponent va hokazo. Shunday qilib olingan xromatogramma bir nechta cho'qqilarni ko'rsatadi,

2.1-rasm. Eluent xromatografiyasi yordamida olingan xromatogramma - moddalarning sorbsiyasi AElutsiyaning eng oddiy varianti izokratik bo'lib, unda eluent tarkibi o'zgarmaydi. Statsionar fazaga yaqin bo'lgan birikmalarni ajratishda qo'llaniladi. Ba'zi hollarda gradientli elyusiya qo'llaniladi, unda komponentlarni ajratish jarayonida eluentning tarkibi berilgan qonunga muvofiq o'zgartiriladi. Bunda mobil fazaning elutsiya kuchi ortadi, buning natijasida kuchli sorbsiyalangan moddalarni ushlab turish vaqti qisqaradi va aralashmaning ajralishi yaxshilanadi.
RP HPLCda ushlab turishni baholashning oddiy qoidasini quyidagicha shakllantirish mumkin: birikma qanchalik hidrofobik bo'lsa, u shunchalik kuchli saqlanadi.
RP HPLC uchun eng keng tarqalgan statsionar faza Cl-Si (CH3) 2-R alkilsilanlar bilan kimyoviy modifikatsiyalangan silika jeldir, bu erda R 1 dan 18 gacha uglerod atomiga ega bo'lgan alkil zanjiridir (2.2-rasm).

2.2-rasm. Bog'langan faza bilan bo'linish xromatografiyasi

Kimyoviy modifikatsiyalangan silikagellar orasida sakkiz (C8) va o'n sakkiz (C18 yoki oktadesilsilil silikagel) uglerod atomiga ega bo'lgan fazalar eng ko'p qo'llaniladi. Shuningdek, RP HPLC silikagellarida fenil (R= – (CH2) 3Ph) va Cyano (R= – (SH2) 3CN) ishlatiladi. "Paxtalangan" oktil (C8) guruhlari bo'lgan silikagelning sirt tuzilishi rasmda ko'rsatilgan. 2.3 [15].

2.3-rasm. "Paxtalangan" oktil (C8) guruhlari bilan silikagelning sirt tuzilishi
Silikagel asosidagi teskari fazali adsorbentning asosiy xarakteristikasi uglerodning massa ulushidir. Bu qiymat statsionar fazaning hidrofobikligini va shuning uchun uning adsorbsion qobiliyatini aks ettiradi. Standart C8 fazasining uglerodining massa ulushi taxminan 12% ni tashkil qiladi; standart S18 fazasi - 16-20%.
RP HPLC tahlil usuli sifatida boshqa HPLC usullariga nisbatan bir qator afzalliklarga ega:
-hozirda bu usul uchun turli uzunlikdagi alkilsilil guruhlari (C2 dan C32 gacha tekis alkil zanjirli, fenil va difenil guruhlari) payvandlangan sorbentlar ishlab chiqilgan va ishlab chiqarishga joriy qilingan;
-teskari fazali ajratishda ishlatiladigan erituvchilar inson organizmida topilgan deyarli barcha eng muhim moddalar guruhlarini, organik kimyoda, neft kimyosida, bioorganik kimyoda keng qo‘llaniladigan dori vositalari, pestitsidlar, gerbitsidlar shaklida qo‘llaniladigan biologik obyektlarni nisbatan osonlik bilan eritadi;
-RP HPLCdagi sorbentlar yangi erituvchilar va erituvchi tarkibining o'zgarishi bilan tezda muvozanatga keladi, bu esa bir xil ustun yordamida bir usuldan ikkinchisiga o'tish imkonini beradi. Sorbentlar erituvchilarni keng xususiyatlarda, shuningdek, har xil turdagi qo'shimchalardan (tuzlar, kislotalar va asoslar, organik modifikatorlar) foydalanishga imkon beradi;
-kolonkadagi ifloslangan sorbentni yuvish va kirlarni olib tashlaydigan erituvchilar kolonnasi orqali haydash orqali ish holatiga qaytarish mumkin.
Sorbentning selektivligini va umuman ustunning samaradorligini baholash uchun xromatografik ajratishning asosiy parametrlaridan foydalaniladi.
2.2 Xromatografik ajratishning asosiy parametrlari
Ustundagi moddaning harakatini tavsiflovchi asosiy xromatografik parametrlar aralashmaning tarkibiy qismini ushlab turish vaqti va ushlab turish hajmidir. Tahlil qilinayotgan namunaga kiritilgan paytdan boshlab cho'qqisi maksimalni qayd etishgacha bo'lgan vaqt tR ushlab turish (elutsiya) vaqti deb ataladi. Saqlash vaqti ikki komponentdan iborat - moddaning mobil t0 va statsionar ts fazalarida turish vaqti [13]:
tR.= t0 + ts. (2.1)

t0 qiymati aslida adsorbsiyalangan komponentning ustunidan o'tish vaqtiga teng. tR ning qiymati namunaning miqdoriga bog'liq emas, lekin modda va sorbentning tabiatiga, shuningdek sorbentning qadoqlanishiga bog'liq bo'lib, har bir ustunga qarab farq qilishi mumkin. Shuning uchun, haqiqiy ushlab turish qobiliyatini tavsiflash uchun tuzatilgan saqlash vaqti t'R kiritilishi kerak [13]:

t'R = tR - t0. (2.2)
Tutilishni tavsiflash uchun ko'pincha VR saqlanish hajmi tushunchasi qo'llaniladi - moddani elutsiya qilish uchun ustundan ma'lum tezlikda o'tishi kerak bo'lgan mobil faza hajmi [13]:
VR = tRF, (2.3)
bu erda F - mobil fazaning hajmli oqim tezligi, sm3s-1.
So'rilmaydigan komponentni (o'lik hajm) yuvish hajmi t0: V0 = t0F bilan ifodalanadi va sorbent bilan band bo'lmagan ustun hajmini, namuna oluvchidan kolonkagacha bo'lgan aloqa hajmini o'z ichiga oladi. ustunni detektorga. Tuzatilgan saqlangan hajm V′R mos ravishda [13]:
V'R = VR - V0. (2.4)
Doimiy xromatografik sharoitlarda (oqim tezligi, bosim, harorat, faza tarkibi) tR va VR qiymatlari qat'iy takrorlanadi va moddalarni aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.
Ikki faza o'rtasida moddani taqsimlashning har qanday jarayoni D ning taqsimlanish koeffitsienti bilan tavsiflanadi D. qiymati cs/c0 nisbati, bu erda st va c0 mos ravishda harakatlanuvchi va statsionar fazalardagi moddaning konsentratsiyasi. Bo'linish koeffitsienti xromatografik parametrlarga bog'liq.
Saqlash xarakteristikasi, shuningdek, sig'im koeffitsienti k' bo'lib, statsionar fazadagi moddaning massasining harakatlanuvchi fazadagi moddaning massasiga nisbati sifatida aniqlanadi: k' = mn/mp. Kapasitans koeffitsienti moddaning harakatsiz fazaga qaraganda necha marta uzoqroq turishini ko'rsatadi. K' qiymati eksperimental ma'lumotlardan formula [13] bo'yicha hisoblanadi:
(2.5)
Xromatografik ajratishning eng muhim parametri xromatografik ustunning samaradorligi bo'lib, uning miqdoriy o'lchovi H balandligi nazariy plastinkaga ekvivalent va nazariy plitalar soni N.
Nazariy plastinka gipotetik zona bo'lib, uning balandligi ikki faza o'rtasidagi muvozanatga erishishga to'g'ri keladi. Ustundagi ko'proq nazariy plitalar, ya'ni. muvozanat qanchalik ko'p o'rnatilsa, ustun shunchalik samarali bo'ladi. Nazariy plitalar sonini to'g'ridan-to'g'ri xromatogrammadan osongina hisoblash mumkin, bu ustun kengligi w va komponentning yashash vaqti tR ni ustunda [13] taqqoslash orqali:
(2.6)
N ni aniqlab, L ustunining uzunligini bilib, H ni hisoblash oson:
(2.7)

Xromatografik ustunning samaradorligi mos keladigan tepalikning simmetriyasi bilan ham tavsiflanadi: tepalik qanchalik simmetrik bo'lsa, ustun shunchalik samarali bo'ladi. Simmetriya KS simmetriya koeffitsienti bilan raqamli ifodalanadi, uni formula [13] bilan aniqlash mumkin:

, (2.8)
bu erda b0,05 - cho'qqi balandligining yigirmadan bir qismidagi cho'qqi kengligi; A - cho'qqi maksimalidan tushgan perpendikulyar va cho'qqi balandligining yigirmadan bir qismidagi cho'qqining old cheti orasidagi masofa.
Xromatografik tahlilning takrorlanuvchanligini baholash uchun nisbiy standart og'ish (RSD) qo'llaniladi, bu namunalar to'plamida natijalarning tarqalishini tavsiflaydi [13]:

bu yerda n - parallel xromatogrammalar soni; x - xromatogrammada mos keladigan tepalikning maydoni yoki balandligini hisoblash yo'li bilan aniqlangan namunadagi komponentning tarkibi; - parallel xromatogrammalardan olingan ma'lumotlar asosida hisoblangan komponent tarkibining o'rtacha qiymati; s2 - olingan natijalarning dispersiyasi.

Xromatografik tahlil natijalari, agar xromatografik tizimning muvofiqligi uchun shartlar bajarilgan bo'lsa, ehtimolli hisoblanadi [19]:
- mos keladigan tepalikdan hisoblangan nazariy plitalar soni kerakli qiymatdan kam bo'lmasligi kerak;
- mos keladigan cho'qqilarni ajratish koeffitsienti talab qilinadigan qiymatdan kam bo'lmasligi kerak;
- mos keladigan cho'qqining balandligi yoki maydoni uchun hisoblangan nisbiy standart og'ish talab qilinadigan qiymatdan oshmasligi kerak;
- mos keladigan tepalikning simmetriya koeffitsienti talab qilinadigan chegaralar ichida bo'lishi kerak.
2.3 Tajribaning apparat dizayni
Zamonaviy suyuqlik xromatografiyasida turli darajadagi murakkablikdagi asboblar - eng oddiy tizimlardan tortib, turli xil qo'shimcha qurilmalar bilan jihozlangan yuqori darajadagi xromatograflargacha qo'llaniladi.
Shaklda. 2.4 har qanday xromatografik tizimda u yoki bu shaklda mavjud bo'lgan minimal talab qilinadigan komponentlar to'plamini o'z ichiga olgan suyuq xromatografning blok diagrammasini ko'rsatadi.

2.4-rasm. Suyuq xromatografning blok diagrammasi: 1 - harakatlanuvchi faza uchun idish; 2 - nasos; 3 - injektor; 4 - ustun; 5 - termostat; 6 - detektor; 7 - ro'yxatga olish tizimi
Mobil faza uchun idishlar (1) sifatida ko'pincha 0,7-1 l hajmli shisha idishlar ishlatiladi. Mobil fazani ehtiyotkorlik bilan gazsizlantirish katta ahamiyatga ega. Erituvchining to'lib ketishiga yo'l qo'ymaslik uchun ushbu operatsiyani to'g'ridan-to'g'ri ko'rib chiqilayotgan idishda bajarish afzaldir.
Suyuq xromatografiya uchun zamonaviy nasoslar (2) ustunga doimiy ravishda hal qiluvchi etkazib berishni ta'minlaydigan va bir necha o'n MPa gacha bosim yaratishga qodir bo'lgan nozik qurilmalardir. Nasosning dizayni birinchi navbatda tizimdagi ish bosimi bilan belgilanadi.
Injektorlar (3) 30-50 MPa gacha bo'lgan bosimlarda yuqori takrorlanishi mumkin bo'lgan 0,1 µl dan bir necha millilitrgacha bo'lgan namunalarni in'ektsiya qilishni ta'minlaydi. Injektorlar yuqori haroratlarda va faol erituvchilar va reagentlarda ishlashi kerak.
HPLC uchun ustunlar (4) 10, 15, 25 sm uzunlikdagi qalin devorli zanglamaydigan po'lat quvurlardir, ichki diametri 4-5,5 mm, yuqori bosimga bardosh bera oladi. Ustunni sorbent bilan qadoqlashning zichligi va bir xilligi muhim rol o'ynaydi. Haroratning barqarorligi termostat tomonidan ta'minlanadi.
Ajratish haroratini oshirish RP HPLC da ustun ish faoliyatini yaxshilaydi. Haroratni barqarorlashtirish miqdoriy aniqlashning aniqligini ham oshiradi, shuning uchun termostatlardan (5) foydalanish juda ma'qul, ba'zan esa majburiydir. HPLC-da havoni intensiv aralashtirishga ega havo termostatlari ko'pincha ishlatiladi, ularda erituvchini isitish uchun issiqlik almashtirgich, dispenser va ustunlar joylashgan.
Suyuqlik xromatografiyasi uchun detektorlar (6) oqim xujayrasiga ega bo'lib, unda oqayotgan elyuentning ba'zi xossalari doimiy ravishda o'lchanadi. Umumiy maqsadli detektorlarning eng mashhur turlari namuna-eluent tizimining sinishi indeksini o'lchaydigan differensial refraktometrlar va belgilangan to'lqin uzunligidagi erituvchining optik zichligini aniqlaydigan spektrofotometrik detektorlardir (odatda ultrabinafsha mintaqada - UV detektorlari). ).
Yozish tizimi (7) eng oddiy holatda differensial kuchaytirgich va magnitafondan iborat. Murakkab xromatografik tizimlarda xromatografni shaxsiy kompyuter bilan bog'laydigan interfeys bloki qo'llaniladi, u nafaqat ma'lumotlarni yig'adi va qayta ishlaydi, balki asbobni boshqaradi.
2.4 Eksperimental texnika
Kurs ishining eksperimental qismida enalapril maleat miqdorini aniqlash usuli uchun kimyoviy modifikatsiyalangan silikagel asosidagi xromatografik kolonani eksperimental yo‘l bilan tanlash hamda ishlatiladigan sorbentga qarab xromatografik ajratish samaradorligini solishtirish vazifasi qo‘yildi.
Enalaprilning strukturaviy formulasi rasmda ko'rsatilgan. 2.5 [20].

2.5-rasm. Enalaprilning tarkibiy formulasi
Enalapril maleat moddasi oq kristall kukun, suvda yomon eriydi, etanol va metanolda eriydi. Enalapril maleat arterial gipertenziya va konjestif yurak etishmovchiligini davolashda, shuningdek, miyokard infarktining kompleks terapiyasida ishlatiladigan biologik faol moddadir.
Uskunalar:
- Mettler Toledo AG204 analitik elektron tarozilar;
-ultratovushli tozalash vositasi Elma T710DH;
- shaxsiy kompyuterga ulangan suyuq xromatograf Agilent 1100.
Materiallar:
- 4,6x250 mm o'lchamdagi, xromatografiya uchun siyanosilil silikagel bilan to'ldirilgan [19], zarracha hajmi 5 mkm Waters RP-CN bo'lgan ustun;
- 4,6x250 mm o'lchamdagi ustun, xromatografiya uchun siyanosilil silikagel bilan to'ldirilgan [19], zarracha hajmi 5 mkm Zorbax XDB-CN;
-o‘lchami 4,6x250 mm bo‘lgan, xromatografiya uchun oktadesilsilil silikagel bilan to‘ldirilgan [19], zarracha hajmi 5 mkm Waters Symmetry C18 bo‘lgan ustun;
- 4,6x250 mm o'lchamdagi ustun, xromatografiya uchun oktasil silikagel bilan to'ldirilgan [19], zarracha hajmi 5 mkm Waters Symmetry C8;
- 4,6x250 mm o'lchamdagi ustun, xromatografiya uchun oktasil silikagel bilan to'ldirilgan [19], zarrachalar hajmi 5 mkm Zorbax SB C8;
- 4,6x250 mm o'lchamdagi ustun, xromatografiya uchun oktadesilsilil silikagel bilan to'ldirilgan [19], zarracha o'lchami 5 mkm Zorbax SB C18;
-xromatografiya uchun sirkoniy oksidi bilan to'ldirilgan 4,6x150 mm o'lchamdagi ustun [19], zarracha hajmi 5 mkm Discovery ZR-RBD;
- 25 ml hajmli o'lchov kolbasi;
- avtomatik mikropipetka 100–250 µl.
Reaktivlar:
-CH3CN xromatografiyasi uchun asetonitril [19];
-xromatografiya uchun suv [19];
-dikaliy gidrofosfat K2HPO4 [19];
- konsentrlangan fosfor kislotasi H3PO4 [19];
-enalapril maleat C20H28N2O5 C4H4O4 moddasi.
Metodologiya [21]:
sinov eritmasi. Taxminan 100 mg (aniq tortilgan) enalapril maleat moddasi 25 ml hajmli o'lchov kolbasiga solinadi, xromatografiya uchun 20 ml suvda eritiladi, eritmaning hajmi xromatografiya uchun suv bilan belgilangan belgiga sozlanadi va aralashtiriladi. Olingan eritmadan 2,5 ml 50 ml hajmli o'lchov kolbasiga solinadi, eritmaning hajmi harakatlanuvchi faza bilan belgilangan belgiga sozlanadi va aralashtiriladi. Eritmaning saqlash muddati - 1 kun.
bufer eritmasi. 1,74 g dikaliy vodorod fosfat 800 ml suvda eritiladi, fosfor kislotasi bilan pH 2,0 ± 0,1 [19] ga sozlanadi, hajmi xromatografiya uchun suv bilan 1000,0 ml ga sozlanadi va aralashtiriladi.
Quyidagi sharoitlarda ultrabinafsha nurlanish detektori bilan suyuq xromatografda 10 mkl etalon eritmaning xromatografi:
- mobil faza - bufer eritmasi - xromatografiya uchun asetonitril (75:25), ultratovushli tozalagichda gazsizlangan;
- mobil faza tezligi 1,5 ml/min;
- 215 nm to'lqin uzunligida aniqlash;
-ustun harorati 60°C.
Xromatografik tizim quyidagi hollarda mos deb hisoblanadi:
- enalaprilning cho'qqisidan hisoblangan nazariy plitalar soni 6000 dan kam bo'lmagan;
-enalapril cho'qqisining simmetriya koeffitsienti 1,7 dan oshmaydi.
2.5 Natijalarni tahlil qilish
Tajriba davomida kimyoviy modifikatsiyalangan silikagellarning ushlab turish qobiliyatini baholash uchun enalapril maleat misolida siyanosilil silikagel asosidagi ustunlar (Waters RP-CN 4,6x250 mm, Zorbax XDB-CN 4,6x250 mm), shuningdek, ustunlar asosidagi ustunlar. oktadesilsilil silika jelida (Waters Symmetry C18 4,6x250 mm, Zorbax SB C18 4,6x250 mm) va oktasilyl (Waters Symmetry C8 4,6x250 mm, Zorbax SB C8 4,6x250 mm sili) sili. Sinov qilingan ustunlar bir xil geometriyaga ega (ustun balandligi va uzunligi, sorbent zarralari hajmi), lekin "payvandlangan" fazalarda farqlanadi. Shuningdek, tajriba oxirida tsirkoniy (IV) oksidi asosidagi kolonna saqlanish qobiliyatining sorbentning tabiatiga bog'liqligini baholash uchun sinovdan o'tkazildi. Zirkonyum (IV) oksidi asosidagi ustunlarning yuqori narxi tufayli 4,6x150 mm o'lchamdagi ustun ishlatilgan (Discovery ZR-RBD 4,
Olingan ma'lumotlar jadvalda keltirilgan. 2 "payvandlanish bosqichi" ga qarab enalapril maleatning saqlanishida sezilarli farqlarni ko'rsatadi.
C18 va C8 guruhlari bilan modifikatsiyalangan silikagellarda enalapril maleatning saqlanish muddati uni toʻliq ajratish uchun yetarli, ammo ustunlar samaradorligi talablarga javob bermaydi (nazariy plitalar soni 6000 dan kam, simmetriyaning eng yuqori koeffitsienti). 1,7 dan ortiq).
Waters RP-CN 4,6x250 mm siyanosilil ustunida, shuningdek, zirkonyum (IV) Discovery ZR-RBD 4,6x150 mm asosidagi ustunda ushlab turish vaqtlari qisqa va saqlanmagan komponentni chiqarish vaqti bilan solishtirish mumkin. Bundan tashqari, bu ustunlar nazariy plitalarning eng kam soniga ega bo'lib, past ajratish samaradorligini ko'rsatadi.
Shunday qilib, enalapril maleatning miqdoriy aniqlash usuli uchun berilgan xromatografik sharoitda belgilangan talablarga javob beradigan optimal xromatografik ustun (2.4-band) xromatografiya uchun siyanosilil silikagel bilan to'ldirilgan 4,6x250 mm kolonna hisoblanadi [19]. zarracha hajmi 5 mkm Zorbax XDB -CN.
Jadval 2. Enalapril maleat moddasi bo'yicha eksperimental ma'lumotlar

Ustun	saqlash vaqti	Pik simmetriya omili	Nazariy ustunlar soni
Suvlar RP-CN 4,6x250 mm, 5 mkm	3.812	-	3504	6.228	1.518	6772
Suv simmetriyasi C18 4,6x250 mm, 5 mkm	7.618	2.280	5254
Suv simmetriyasi C8 4,6x250 mm, 5 mkm	9.382	2.314	6779
Zorbax SB C8 4,6x250 mm, 5 mkm	8.483	1.987	5035
Zorbax SB C18 4,6x250 mm, 5 mkm	7.724	2.313	4284
Discovery ZR-RBD 4,6x150 mm, 5 mkm	1.969	1.395	1343

xulosalar

Kurs ishida silikagelni sanoat, texnika va fanda qo‘llashning eng muhim yo‘nalishlari, silikagelning adsorbsion xossalarining uni olish va keyingi qayta ishlash usuliga bog‘liqligini nazariy asoslash, shuningdek, kremniy dioksididan foydalanish masalalari ko‘rib chiqiladi. analitik yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida jellar.
O'tkazilgan tadqiqotlar asosida quyidagi xulosalar chiqarish mumkin:
- silikagellarning adsorbsion qobiliyati strukturaning g'ovakligiga bog'liq: silikagelning zarracha kattaligi qanchalik kichik bo'lsa, uning adsorbsion xususiyatlari shunchalik yaxshi bo'ladi;
- silikagelning boshqa g'ovakli materiallarga nisbatan eng muhim afzalligi - hosil bo'lish jarayonida uning tuzilishini o'zgartirish imkoniyati;
- kimyoviy modifikatsiya orqali ma'lum moddalarga nisbatan silikagel o'ziga xosligini berish uning yuzasida silanol va siloksan guruhlari mavjudligi sababli mumkin, bu uni qo'llash doirasini sezilarli darajada kengaytiradi;
- silikagelning eng istiqbolli qo'llanilishidan biri uning HPLC ustunlarida statsionar faza sifatida qo'llanilishi bo'lib, bu zamonaviy texnologiyalar asosida zarracha o'lchamlari 3,5, 5, 7 yoki 20 mikron bo'lgan silikagellarni ishlab chiqarish tufayli mumkin bo'ldi;
- silikagel asosidagi statsionar fazalar bir-biridan sezilarli darajada farq qilishi mumkin: dastlabki silikagelni olish usuli bilan; zarracha shakli; silika jelidagi aralashmalarning tarkibi; zarrachalar hajmi va o'lchamlari taqsimoti; g'ovak o'lchamlari va g'ovak hajmi taqsimoti; "greft" da silikagel yuzasida joylashgan kremniy atomidagi o'rinbosarlar; modifikatorning "payvandlash" zichligi; qo'shimcha bosqichli ishlov berish;
- xromatografik ustunning samaradorligi, shuningdek, ushlab turish vaqti, eng yuqori simmetriya koeffitsienti, nazariy plitalar soni va nazariy plastinka balandligi kabi xromatografik parametrlar va natijada tahlil natijalarining takrorlanishi xususiyatlari bilan belgilanadi. ishlatiladigan sorbentlar;
- xromatografik ustunni optimal tanlash ajratiladigan moddalarning kimyoviy tabiatiga va xromatografik sharoitga bog'liq.
HPLCda turli xil tahliliy muammolarni hal qilish sorbentlarning tuzilishi, ularning xossalari, qo'llanilish sohasi va tahlil usullarini optimallashtirish usullarini bilishga asoslanadi.
Usullarni optimallashtirish zarurati, masalan, dori sifatini nazorat qilish laboratoriyalarida ko'p sonli ketma-ket tahlillar o'tkazilganda paydo bo'ladi. Optimallashtirilgan ajratish texnikasi har bir tahlil vaqtini qisqartiradi, bu esa kamroq erituvchi sarfini va ish kuni davomida suyuqlik xromatografining umumiy mahsuldorligini oshirishni anglatadi. Bunda xromatogrammada faqat tahlil qilinayotgan moddalarning cho'qqilari emas, balki ulardagi mumkin bo'lgan aralashmalarning cho'qqilari ham yaxshi echilishi kerak. Ajratish usullarini optimallashtirish uchun eng muhim omil sorbentni to'g'ri tanlashdir.
Ishning eksperimental qismida HPLC yordamida enalapril maleat dori moddasini miqdoriy aniqlash uchun optimal adsorbsion xususiyatlarga ega kimyoviy modifikatsiyalangan silikagel asosidagi xromatografik ustunni eksperimental ravishda tanladik. Eng samarali ustun sifatida xromatografiya uchun siyanosilil silikagel bilan to'ldirilgan 4,6x250 mm kolonna [19] zarracha hajmi 5 mkm Zorbax XDB-CN tanlangan.

Adabiyotlar ro'yxati

1. Dubinin M.M. Sorbsiya texnologiyasining fizik-kimyoviy asoslari, 2-nashr. ONTI, 1935 yil.
2. Alekseevskiy E.V. Mudofaa kimyosining umumiy kursi, I qism. ONTI Himteoret., L., 1935 yil.
3. Nikitin S.N. Silikagel va uning qora metallurgiyada qo'llanilishi. Metallurgizdat, M., 1941 yil.
4. Neimark I.E., Sheinfain R.Yu. Silikagel, uni tayyorlash, xossalari va qo'llanilishi. - Kiev: Naukova Dumka, 1973. - 200 p., kasal.
5. Freidlin L. X. Kimyodagi yutuqlar, 1954, 23, 581.
6. Dzisko V.A. Ayrim oksidli katalizatorlarni tayyorlashning ratsional asoslari. Nashr etilgan ishlar to'g'risida hisobot, Novosibirsk, 1965 yil.
7. Moddalarning katalitik xossalari. V.A. tomonidan tahrirlangan. Reyter. «Ilmiy fikr», K., 1968 yil.
8. Berkman S., Morell D., Egloff G. Noorganik va organik kimyoda kataliz, ikkinchi kitob. Gostoptekhizdat, M.-L., 1949 yil.
9. Okatov A.B. - ZhPKh, 1929, 2, 21; Kolloid kremniy kislotasi va uning adsorbsion xususiyatlari, L., Qizil Armiya Harbiy-texnika akademiyasining nashriyoti, 1928 yil.
10. Berestneva Z.Ya., Koretskaya TA, Kargin V.A. - Kolloid jurnal, 1949, 11, 369.
11. Berestneva Z.Ya., Koretskaya G.A., Kargin V.A. - Kolloid jurnal, 1950, 12, 338.
12. Kiselev A.V., Yashin Ya.I. - Kitobda: Gaz xromatografiyasi. OKBA Dzerjinskiy filiali nashriyoti, 1966, 131.
13. Analitik kimyo asoslari. 2 kitobda. 1-kitob. Umumiy masalalar. Ajratish usullari: Universitetlar uchun darslik / Yu.A. Zolotov, E.N. Doroxova, V.I. Fadeev va boshqalar. Ed. Yu.A. Zolotova. - 3-nashr, qayta ko'rib chiqilgan. va qo'shimcha - M .: Yuqori. maktab, 2004. - 361 b.: kasal.
14. Tsvet M.S. // Varshava tabiatshunoslar jamiyatining ma'ruzalari, dep. biologiya, 1903, 4-v., bet. 20–32. 2 Snyder L K Kirkland JJ Zamonaviy suyuqlik xromatografiyasiga kirish. 2-nashr. J. Wiley, NY, 1979. 863 p.
15. ZORBAX™ yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi uchun sorbentlar. Foydalanuvchi uchun qoʻllanma. - Kiev, 2001 yil.
16. Biokimyoda yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi: Per. Ingliz tilidan. / Ed. A. Xenshen va boshqalar - M .: Mir, 1988 - 688 p., kasal.
17. Styskin E.L., Itsikson L.B., Braude E.V. "Amaliy yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi". – M.: Kimyo, 1986, 288 b.
18. Kiselev A.V., Yashin Ya.I. Adsorbsion gaz va suyuqlik xromatografiyasi. – M.: Kimyo, 1979, 288 b.
19. Mashkovskiy M.D. Dorilar. - 15-nashr, qayta ko'rib chiqilgan, tuzatilgan. va qo'shimcha - M .: Yangi to'lqin, 2006, s. 438–439.
Shunga o'xshash ishlar - Silika gel va uning yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasida qo'llanilishi
1-savol