|
Hajmni to‘ldirish.
Korxona usuliga ko‘ra tekshirilarni olib boriladi.
flakon tarkibini 10 ml graduirlangan o‘lchov silindr solib hajmni o‘lchashadi. 5 ta shunday
flakonlarni xuddi shu usulda o‘tkaziladi.
Talab: 5,0 ml kam bo‘lmasin.
pH ga mos keluvchi tekshirishlar olib boriladi. Suyultirilmagan eritmani pH o‘lchamini
o‘lchab pH metrga mos kelishini tekshiriladi. Talabi: 4,5 – 5,0.
Miqdoriy tahlil.
Gramitsidin tarkibiningmiqdoriy tahlili.
Tekshirishlarni korxona usuli bo‘lgan turbidimetrik usulda olib boriladi.
Gramitsidin tarkibining tahlilini namunadagi dori vositasida olib boriladi:
1 ml namunani 54 ml etanolda gramitsidin eritmasini1 mg/ml hosil bo‘lguncha eritiladi.
Framitsitin sulfatning miqdoriy tahlili.
Tekshirishlarni korxona usuli bo‘yicha agardagi diffuziya usulida olib boriladi.
Framitsetin sulfat tarkibini namudagi jori vositasida aniqlanib, 5 ml namudani eritib olingan
100 mg/ml framitsetin eritmasi bilan mos kelishi kerak, takroran o‘tkaziladi.
Deksametazonva fenil etilli spirtni tarkibini miqdoriy tahlili .
Tekshirishlarni korxona usuliga mos bo‘lgan YUSSX usulida olib boriladi.
Reaktivlar:
0,04 M bufer:
13,6 g tetrabutilammoniya gidrogensulfat tortib 100 ml o‘lchov kolbasiga
solinadi va 800 ml distillangan su bilan eritiladi. 34 ml 1N NaOH , 0,74 g limon kislota va 4,68 g
228
quruq natriy fosfat ikki marta o‘rin almashuvchi qo‘shiladi. rN ko‘rsatkichlari 6,6 va 7,0 gacha
o‘tkaziladi. Belgigacha bilan distillangan suv bilan etkaziladi.
Sitrat buferi, rN4,9 :
0,2 g limon kilota va 0,14 natriy sitratni 8000 ml distillangan suvda
eritiladi. rN ko‘rsatkichlari 6,6 va 7,0 gacha o‘tkaziladi. Belgigacha bilan distillangan suv bilan
etkaziladi.
Ichki standart eritma:
0,1% propilgidroksibenzoat ni metanoldagi eritmasi.
Standart eritma:
2,4 g (aniq tortma) fenil etil spirtdan 100 ml hajmli kolbaga solib, 10 ml etanol bilan eritiladi
va sitrat buferi bilan hajmni belgigacha to‘ldiriladi, rN = 4,9.
0,080 g (aniq tortma) o‘lchanib natriy metasulbenzoat deksametozon ishchi standart ni 100
ml o‘lchov kolbasiga solinadi.
25,0 ml (aniq hajm) olib eritmaA o‘sha kolbaga solib, ultra to‘lqinda eriguncha ishlov
beriladi. Sitrat buferi bilan hajmni belgigacha to‘ldiriladi, rN = 4,9. Eritma B.
10 ml (aniq hajm) olib eritma B 50 ml o‘lchov kolbasiga solib, 2 ml standart eritmasidan
qo‘shib, sitrat buferi bilan hajmni belgigacha to‘ldiriladi, rN = 4,9. Ikkinchchi standart eritmani
xuddi shu usulda tayyorlanadi.
Tekshirilayotgan eritma
. ikkita har xil namunani har seriyadan tanlaniladi.
Usuli:
10 ml (aniq hajm) olib, 50 ml o‘lchov kolbasiga solib, 2,0 ml standart eritmasidan
qo‘shib, sitrat buferi bilan hajmni belgigacha to‘ldiriladi, rN = 4,9. Aralshtiriladi va membranali filtr
orqali filtrlanadi.
Xromatografik kolonkaga 20 mkl dan standart va tekshirilayotgan eritmalarni solinadi.
Saqlash vaqti va dog‘ yuzasini nisbiy hisoblab topiladi.
Xromatografirlash muhiti:
Kolonka: 15×4,6 m zanglamaydigan po‘lat
Harakatlanuvchi faza: Metanol: 0,04 M bufer (60:40)
Harakatsiz faza :
ODS – gipersil, zararcha o‘lchami - 5μ
Oqim tezligi : 1,2 ml/daq
Aniqlanish: UB, 254 nm to‘lqin uzunligi
Kiritish hajmi: 20 mkl
Mezgirligi: 256
Harorat : 30°S
Nisbiy saqlab turish vaqti:
Fenil etilli spirt: 0,6
Ichki standart: 1,0
Deksametazon: 1,9
YUSSX sharoiti absolyut hisoblanmaydi, shuning uchun bu paramtrlarni nisbatini
harakatlanuvchifaza va oqim tezligi, kolonkaning ishlatilishni samaradorligiga mos kelishi kerak.
Standart va tekshirilayotgan eritmani dog‘ yuzasini ishlatib, konsentratsiya hisoblaniladi.
Hisoblash:
1. Fenil etilli spirt tarkibining tahlilni (X) % larda quyidagi formula orqali topiladi:
100
100
10
50
50
10
100
25
100
Р
m
А
A
X
ст
ст
обр
bu erda:
A
obr
– tekshirilayotgan eritmaning xromatogrammasidagi deksametazon dog‘ining yuzasi
A
st
- standart eritmaning xromatogrammasidagi deksametazon dog‘ining yuzasi
m
ct
- fenil etilli spirtning standart namunasining tortmasi, g
R – quritilgan substansiyan i moddaning tarkibi, %
2. Deksametazon tarkibining tahlilni (Y)% larda quyidagi formula orqali topiladi:
229
100
100
10
50
50
10
100
Р
m
А
A
Y
ст
ст
обр
bu erda:
A
obr
– tekshirilayotgan eritmaning xromatogrammasidagi deksametazon dog‘ining yuzasi
A
st
- standart eritmaning xromatogrammasidagi deksametazon dog‘ining yuzasi
m
ct
- fenil etilli spirtning standart namunasining tortmasi, g
R – quritilgan substansiyan i moddaning tarkibi, %
Xromatografik tizimining yaroqliligini tekshirish:
Assimetriya koeffitsient dog‘ining 0,80 va 1,6 oralig‘ida bo‘lishi kerak.
Feniletil va ichki standart dog‘laring bo‘linish kriteriysi 5,0 dan kam bo‘lmasligi kerak.
Dog‘larning vaqti ±10 chetlanish ruxsat beriladi:
feniletilli spirt : 156 se
Ichki standart : 272 sek
Deksametazon : 517 sek
Do'stlaringiz bilan baham: |
