Copper metallurgical slags: mineralogy, bio/weathering processes and metal bioleaching

ii) Bacteria used in bioleaching experiments 
A  gram-negative  bacterial  strain  of  A.  thiooxidans  (DSM  9463)  was  grown  in  salt  medium 
composed of 2 g ammonium sulfate (NH
4
)
2
SO
4
, 0.25 g of magnesium sulfate (MgSO
4
·7H
2
O), 
0.1  g  di-potassium  hydrogen  phosphate  (K
2
HPO
4
),  0.1  g  potassium  chloride  (KCl)  and  1% 
(w/v)  of  elemental  sulfur  (S)  per  1  L  of  ultrapure  water.  pH  of  the  growth  medium  was 
adjusted  to  2.5  and  bacteria  was  grown  two  times  over  one  week  in  order  to  adjust  to  pH 
conditions  lower  than  its  optimal  (pH=3.5).  Two  percent  (v/v)  of  pre-grown  inoculum  was 
introduced to each biotic batch flask. 

---

CHAPTER 3: MATERIALS AND METHODS
 
 
85 
 
A gram-negative bacterial strain of P. fluorescens (DSM 50091) used as the bioleaching agent 
was  purchased  from  DSMZ.  This  bacterium  was  initially  grown  in  nutrient  broth  medium 
(pH=6.9) for 24 h. Afterwards, the cells were harvested and washed 3 times using sterile 5% 
NaCl. This bacterium was then re-suspended in ultrapure water and 2% (v/v) of inoculum was 
supplemented into respective batch incubations.