Бумажная хроматография

БУМАЖНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
Этот тип распределительной хроматографии широко используется при анализе сложных смешанных веществ (белков, углеводов, гормонов и других природных соединений). Для этой хроматографии используют специальные фильтровальные бумаги, в бумажной хроматографии неотталкивающая фаза, которая постоянно адсорбируется на бумаге, а сама бумага выступает в роли адсорбента. Растворители или смеси растворителей, предварительно насыщенные водой, также считаются фазой покрытия.
В зависимости от направления растворителя различают два типа этой хроматографии: восходящую, нисходящую и горизонтально-ротационную хроматографию. Ниже мы познакомимся с рабочим методом широко используемой восходящей бумажной хроматографии. Ширина специальной хроматографической бумаги несколько меньше диаметра цилиндра, используемого для хроматографии, она обрезается в пределах 40-60 см, а на 2-3 см выше дна наносится карандашом горизонтальная линия. бумага. На эту линию на бумагу (с интервалом 2-2,5 см) с помощью стаканчика накапывают несколько капель растворов исследуемых соединений и чистого вещества или раствора чистых веществ, которые должны быть этой смесью. капилляр, бумагу высушивают и добавляют к ней растворитель или растворители, опускают в цилиндр, используемый для специальной хроматографии с системой, и подвешивают бумагу на стеклянной подвеске так, чтобы она не касалась стенок цилиндра .нижняя часть бумаги, чем пятна, на которые была нанесена смесь веществ, касается системы растворителей, впитывается в растворяющую бумагу и, поднявшись на определенную высоту, снимается хроматограмма из камеры, и достигается граница по растворителю определяется - фронт. После этого бумагу сушат и обрабатывают специально подобранными красителями с помощью пульверизатора. В результате на хроматографической бумаге образуются различные цветные «пятна», которые называются хроматограммой. Пятна, образовавшиеся на хроматограмме, следует быстро обвести карандашом, так как со временем эти пятна могут потускнеть. Для идентификации испытуемого чистого вещества или смеси веществ на полученной хроматограмме используют коэффициент корреляции (К) в используемой для этих веществ системе растворителей. Коэффициент распределения (К) рассчитывается по следующей формуле:

где а — расстояние от точки падения вещества до центра пятна, v — расстояние от стандартной линии до фронта растворителя.

Величину К, определяемую в определенной системе растворителей, находят по определенной таблице, составленной для чистых веществ, какому веществу она соответствует. Но величина К зависит от используемой системы растворителей, температуры, типа бумаги, количества выпавшего вещества и др. Поэтому идентификация веществ в бумажной хроматографии осуществляется с участием определенных веществ - "свидетелей".
4. ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
В дальнейшем при анализе синтетических, особенно природных веществ, более удобным и быстрым методом хроматографии является тонкослойная хроматография. Преимущество этого метода в том, что можно контролировать ход химических реакций, наблюдать за разделением сложных смесей на отдельные компоненты с помощью колонки, быстро готовить хроматографические пластины и быстрее идентифицировать вещества. Однократная хроматография веществ в тонком слое занимает всего 10-30 минут.
Техника работы этой хроматографии начинается с формирования тонкого слоя адсорбента на стеклянных пластинах разного размера (8х15; 10х20 и т. д.). Для этого один из адсорбентов (оксид алюминия, силикагель и др.) берут на стеклянную пластину и перемещают по ней специальное устройство для формирования тонкого слоя.Затем с помощью стеклянного капилляра на пластину капают несколько капель раствора исследуемого вещества, где образуется тонкий слой, и пластину переносят в окислитель, снабженный специальной системой растворителей. После поглощения растворителя всей поверхностью адсорбента на пластине хроматограмму вынимают из эксикатора, сушат и обрабатывают парами йода или растворами других красителей. Тонкий слой, полученный этим методом, называется неадгезивной тонкослойной хроматографией на поверхности стекла, и тонкий слой часто быстро разрушается.
Поэтому часто применяют тонкослойную хроматографию, где адсорбент прочно прилипает к поверхности стекла. Для приготовления таких сцепляющихся тонкослойных пластин формируют суспензию адсорбера с 5% гипса, и с помощью специального «валика» тонкий слой хорошо сцепляется с поверхностью стекла, и его можно использовать в одностороннем порядке. или двухсторонняя хроматография в любом направлении. Часто этим методом готовят несколько пластин и хранят в эксикаторах.