Азотнинг табиатда айланиши


Тоза вирус препаратини олиш йўлларини ўрганиш



Download 1,18 Mb.
bet51/52
Sana19.05.2023
Hajmi1,18 Mb.
#941028
1   ...   44   45   46   47   48   49   50   51   52
Bog'liq
Virusologiya yakuniy

120. Тоза вирус препаратини олиш йўлларини ўрганиш
Ишдан мақсад. Ҳар хил тезликда моддаларни чўкмага тушишига асосланиб вирусларни тоза препаратини олиш усули билан таништириш.
Ишнинг бориши. Центрифуганинг яхшилаб ювилиб қуритилган пробиркаларига вирусли эритма ( аввалги машғулотдаги қисман тозаланган вирусли намуна) центрифуга қопқоғидаги қараш тешикчасигача қуйилади, сўнгра пробиркалар тарози ёрдамида тенглаштирилади ва қопқоқлар аввал қўл билан, сўнгра махсус "калит-мослама" билан ёпилади. Пробиркаларнинг тенглиги қайта торозида текширилади, сўнгра бурама қопқоқлари билан герметик ёпилади (агар пробиркаларнинг бири оғирроқ бўлса, баробарлаштириш учун шприц ёрдамида эритмадан қўшилади).
Пробиркалар центрифугани роторига бир-бирига қарама-қарши қилиб қўйилади. Ротор зич қилиб қопқоқ билан ёпилади ва центрифуга камерасига жойлаштирилади . Центрифугалаш 90 минут давомида 105 000 g да олиб борилади.Центрифуга тўхтагандан сўнг, ротордан пробиркаларни чиқариб олинади, пробирканинг энг тагида озгина жигарранг вирус чўкмаси ва чўкма усти суюклиги кузатилади. Чўкма усти суюқлигини тўкиб ташланади, вирус чўкмасини эса озгина 0,01 М трис-HCl буферида (рН-7,6) эритилади. Агар вирус яхши тозаланган бўлса оқ-ҳаворанг "опалесценция" кузатилади. Эритмани 15-18 минг айл./тезлигида центрифугаланади ва эримаган қисмидан ажратилади. Эримаган чўкмани яна бир марта 1-2 мл буферда эритиб, чўктириб, чўкмаусти суюқлигини асосий вирус эритмасига қўшилади ва сақланади.
Шу дифференциал центрифугалаш циклини 3 - 4 марта қайтариб етарлича тозаланган вирус препарата олинади. Вирусларнинг ўлчамлари (10-600 нм) ва зичликлари шундайки, агар улар марказдан қочма кучини 30000 дан
200000g таъсир эттирилса, вирус зарралари чўкмага тушади. Шу мақсадда центрифугаларнинг роторларини минутига 50000 — 60000 марта айланадиган центрифугалари ишлатилади.
Дифференциал центрифуга усулида вирус тозалаганда вирусни суспензиядан чўктирилади, бошқатдан суспензия ҳолатига ўтказилади, совуқда магнит айлантиргичида чайқатилади ҳамда паст тезликда центрифугаланади (6000 g, 30 мин). Бу жараённи бир неча марта қайтариш мумкин.
Ҳайвон вирусларини, бактериофагларни бир цикл дифференциал центрифугалаш билан тозалаш қийин бўлади. Бунда аввал ҳар хил усулларда (м., ионалмашиш хроматографияси) вирус тозалаш босқичларидан ўтиб, вирусни катта ҳажмли суюкликдан кичик хажмга ўтказишда ишлатилиши мумкин. Ўсимлик вирусларини тозалагида бу метод яхши самара беради.

Download 1,18 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   ...   44   45   46   47   48   49   50   51   52




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling

kiriting | ro'yxatdan o'tish
    Bosh sahifa
юртда тантана
Боғда битган
Бугун юртда
Эшитганлар жилманглар
Эшитмадим деманглар
битган бодомлар
Yangiariq tumani
qitish marakazi
Raqamli texnologiyalar
ilishida muhokamadan
tasdiqqa tavsiya
tavsiya etilgan
iqtisodiyot kafedrasi
steiermarkischen landesregierung
asarlaringizni yuboring
o'zingizning asarlaringizni
Iltimos faqat
faqat o'zingizning
steierm rkischen
landesregierung fachabteilung
rkischen landesregierung
hamshira loyihasi
loyihasi mavsum
faolyatining oqibatlari
asosiy adabiyotlar
fakulteti ahborot
ahborot havfsizligi
havfsizligi kafedrasi
fanidan bo’yicha
fakulteti iqtisodiyot
boshqaruv fakulteti
chiqarishda boshqaruv
ishlab chiqarishda
iqtisodiyot fakultet
multiservis tarmoqlari
fanidan asosiy
Uzbek fanidan
mavzulari potok
asosidagi multiservis
'aliyyil a'ziym
billahil 'aliyyil
illaa billahil
quvvata illaa
falah' deganida
Kompyuter savodxonligi
bo’yicha mustaqil
'alal falah'
Hayya 'alal
'alas soloh
Hayya 'alas
mavsum boyicha


yuklab olish